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抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時(shí)間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個(gè)球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)大的球蛋白??乖醮未碳C(jī)體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時(shí)間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。
別 名 G-protein coupled receptor 38; GPR38; MLNR; Motilin receptor; MTLR; MTLR_HUMAN; MTLR1.
英文名稱 Anti-MTLR
中文名稱 胃動(dòng)素受體抗體
濃 度 1mg/1ml
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Dog, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 **學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MTLR C-terminus
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
磷酯酶Cγ1(PLCγ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforPhospholipaseCGamma1(PLCg1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
胰島素樣生長因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforInsulinLikeGrowthFactor1(IGF1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
球蛋白A1(IgA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforImmunoglobulinA1(IgA1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
抗原9(LY9)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforLymphocyteAntigen9(LY9) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforInsulinAutoantibody(IAA) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
β-乳球蛋白(βLg)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforBeta-Lactoglobulin(bLg) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
肌球蛋白ⅠA(MYO1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforMyosinIA(MYO1A) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
蛋白激酶Cα(PKCα)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforProteinKinaseCAlpha(PKCa) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶14(GALNT14)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforPolypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase14(GALNT14) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
谷氨酸脫氫酶2(GLUD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforGlutamateDehydrogenase2(GLUD2) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
Tryptic Soy Broth
DPBS,(1X),(IVD) 含1000mg/l葡萄糖,36mg/l丙酮酸鈉,
鈣鎂離子,不含酚紅14287-080
Malt Extract 麥芽提取物 Sigma500
尿素肉湯基礎(chǔ) (Christensen 瓊脂基礎(chǔ)) (CM0071) Oxoid
W.L.營養(yǎng)培養(yǎng)基 (CM0309) Oxoid
改良谷氨酸鹽礦物培養(yǎng)基(CM0607) Oxoid
龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
胃動(dòng)素受體抗體對氟鹽酸鹽分子式:162.59CAS號(hào):823-85-8分子量: C6H8ClFN2
重碘酸氫鉀分子式:389.91CAS號(hào):13455-24-8分子量: KHI2O6
五內(nèi)脂英文名稱:Body fat分子量:C30H44O4CAS號(hào):136040-43-2
無水氯鋁分子式:133.34CAS號(hào):7446-70-0分子量: AlCl3
3-(3-硝)-1H-吡唑分子式:189.17CAS號(hào):59843-77-5分子量: C9H7N3O2
番茄汁英文名稱:Tomato Juice分子量:C42H38O20CAS號(hào):81-27-6
番瀉苷B英文名稱:The B分子量:C43H38O20CAS號(hào):128-57-4
鹽利托君英文名稱:Ritodrine hydrochloride分子量:C17H22ClNO3CAS號(hào):23239-51-2
金蓮橙O英文名稱:Tropeolin O分子量: C12H9N2O5S.NaCAS號(hào):547-57-9
硫酸氫鉀分子式:136.17CAS號(hào):7646-93-7分子量: KHSO4