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抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
別 名 Melanoma inhibitory activity 2; Melanoma inhibitory activity protein 2; Mia2; MIA2_HUMAN.
英文名稱 Anti-MIA2
中文名稱 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 **學(xué) 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 59kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MIA2
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)大的球蛋白??乖醮未碳C體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強,是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。
Anoctamin7蛋白(ANO7)elisa檢測試劑盒英文名稱:ANO7 ELISA Kit,英文縮寫:ANO7,產(chǎn)品別名:Anoctamin7蛋白(ANO7)ELISA檢測試劑盒,Anoctamin7蛋白(ANO7)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)elisa檢測試劑盒英文名稱:HSPA1L ELISA Kit,英文縮寫:HSPA1L,產(chǎn)品別名:70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)ELISA檢測試劑盒,70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Ⅳ型膠原α1(COL4α1)elisa檢測試劑盒英文名稱:COL4α1 ELISA Kit,英文縮寫:COL4α1,產(chǎn)品別名:Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA檢測試劑盒,Ⅳ型膠原α1(COL4α1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
160kDa核孔蛋白(NUP160)elisa檢測試劑盒英文名稱:NUP160 ELISA Kit,英文縮寫:NUP160,產(chǎn)品別名:160kDa核孔蛋白(NUP160)ELISA檢測試劑盒,160kDa核孔蛋白(NUP160)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
組胺(HIS)elisa檢測試劑盒英文名稱:HIS ELISA Kit,英文縮寫:HIS,產(chǎn)品別名:組胺(HIS)ELISA檢測試劑盒,組胺(HIS)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
腫瘤特異性生長因子(TSGF)elisa檢測試劑盒英文名稱:TSGF ELISA Kit,英文縮寫:TSGF,產(chǎn)品別名:腫瘤特異性生長因子(TSGF)ELISA檢測試劑盒,腫瘤特異性生長因子(TSGF)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
脂磷壁酸(LTA)elisa檢測試劑盒英文名稱:LTA ELISA Kit,英文縮寫:LTA,產(chǎn)品別名:脂磷壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒,脂磷壁酸(LTA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
早期前列腺癌抗原2(EPCA2)elisa檢測試劑盒英文名稱:EPCA2 ELISA Kit,英文縮寫:EPCA2,產(chǎn)品別名:早期前列腺癌抗原2(EPCA2)ELISA檢測試劑盒,早期前列腺癌抗原2(EPCA2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
幽門螺旋IgG(Hp-IgG)elisa檢測試劑盒英文名稱:Hp-IgG ELISA Kit,英文縮寫:Hp-IgG,產(chǎn)品別名:幽門螺旋IgG(Hp-IgG)ELISA檢測試劑盒,幽門螺旋IgG(Hp-IgG)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
乙醛脫氫酶(ALDH)elisa檢測試劑盒英文名稱:ALDH ELISA Kit,英文縮寫:ALDH,產(chǎn)品別名:乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA檢測試劑盒,乙醛脫氫酶(ALDH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
胰蛋白酶(trypsin)elisa檢測試劑盒英文名稱:trypsin ELISA Kit,英文縮寫:trypsin,產(chǎn)品別名:胰蛋白酶(trypsin)ELISA檢測試劑盒,胰蛋白酶(trypsin)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
BROLAC Agar bromothymol-blue lactose agar 溴百里酚藍(lán)乳糖瓊脂 1.01639.0500MERCK默克
Dnase test agar DNA酶測試瓊脂 1.10449.0501MERCK默克
Lysine iron agar賴氨酸鐵瓊脂 1.11640.0500MERCK默克
Pseudomonas Selective Agar 1.07620.500MERCK默克
亮綠瓊脂 選擇分離除傷寒沙門外的沙門氏,可與新生霉素添加劑合用500g
Violet Red Bile Glucose Agar
D/E中和瓊脂 能中和抗微生物的化學(xué)試劑,用于環(huán)境標(biāo)本中檢測和計數(shù)表面微生物500g
黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體半二甲酚橙英文名稱:Semixylenol orange分子量: C24H23NNa2O9SCAS號:19329-67-0
5-氟-2-硝三氟甲分子式:209.1CAS號:393-09-9分子量: C7H3F4NO2
N-乙-3-甲酸乙酯分子式:CAS號:分子量:
千層紙素A英文名稱:Thousand layer of paper A分子量:C16H12O5CAS號:480-11-5
間甲酚紫英文名稱:M-cresol purple分子量: C21H18O5SCAS號:147200
醋諾孕酮英文名稱:Vinyl acetate分子量: C23H30O4CAS號:7759-35-5
2,6-二氟硝分子式:159.09CAS號:19064-24-5分子量: C6H3F2NO2
雪上一枝蒿乙素英文名稱:Bullatine B分子量:C24H39NO6CAS號:466-26-2
1,4-雙(二氟甲)分子式:178.12CAS號:369-54-0分子量: C8H6F4
α,α'-雙(4-)-1,4-二異丙分子式:344.5CAS號:298313分子量: C24H28N2