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注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T柯薩奇病毒A2型PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63378 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)ELISA試劑盒 MMP25 ELISA Kit 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體英文名稱:CFTR 0.2ml
基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體英文名稱:CKIP-1 0.2ml
基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)ELISA試劑盒 MMP-2 ELISA Kit CD40L抗體英文名稱:CD40L 0.1ml
基質(zhì)金屬蛋白酶1酶原(Pro-MMP-1)ELISA試劑盒 Pro-MMP-1 ELISA Kit α-s1酪蛋白抗體英文名稱:Alpha s1 Casein 0.2ml
基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP-14)ELISA試劑盒 MMP-14 ELISA Kit CIDEB抗體英文名稱:CIDEB 0.2ml
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 MMP-13 ELISA Kit 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體英文名稱:Scavenging Receptor SR-BI 0.1ml
基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)ELISA試劑盒 MMP-12 ELISA Kit 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基7A抗體英文名稱:COPS7A 0.2ml
基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒 MMP11 ELISA Kit 細(xì)胞凋亡抑制因子抗體英文名稱:Survivin 0.1ml
基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒 MMP-10 ELISA Kit D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體英文名稱:Clostridium perfringens type D 1ml
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 MMP-1 ELISA Kit 降鈣素抗體英文名稱:Calcitonin 0.1ml
基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒 MGP ELISA Kit 20號染色體開放閱讀框14抗體英文名稱:C20orf14 0.2ml
基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒 LUM ELISA Kit 結(jié)締組織生長因子抗體英文名稱:CTGF 0.1ml
肌質(zhì)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶(ATP2A1)ELISA試劑盒 ATP2A1 ELISA Kit 細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗體英文名稱:CTLA4 0.2ml
肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒 dystrophin ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框38抗體英文名稱:C1orf38 0.2ml
肌抑素(MSTN)ELISA試劑盒 MSTN ELISA Kit 降鈣素受體抗體英文名稱:Calcitonin receptor 0.1ml
50T柯薩奇病毒A2型PCR檢測試劑盒雞屎藤苷 paederoside 20547-45-9 10mg
白芨多糖(70%) Bletilla striata extract 20mg
衡州烏藥堿 Coclaurine 486-39-5 10mg
三七皂苷FC Notoginsenoside Fc 88122-52-5 20mg
茯苓酸A(95%) Poricoic acid A 137551-38-3 10mg
桉脂素 Eudesmin 526-06-7 10mg
博落回總堿 Pink Plumepoppy 20mg
毛冬青皂苷B2 ilexsaponin B2 108906-69-0 10mg
甲基正壬酮 2-Undecanone 112-12-9 50mg
金腰乙素 Chrysosplenetin 603-56-5 10mg
喬松素-7-O-β-D-葡萄糖苷 Ponocembrin-7-O-β-D-glucopyranoside 75829-43-5 10mg
三七皂苷Fe Notoginsenoside Fe 88105-29-7 20mg
三七皂苷Fa(95%) Notoginsenoside Fa 88100-04-3 20mg