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它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63404 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
對氧磷酶-3(PON3)ELISA試劑盒 PON3 ELISA Kit 原癌基因CD39樣蛋白4抗體英文名稱:CD39L4 0.2ml
對氧磷酶(PON)ELISA試劑盒 PON ELISA Kit 膠原樣蛋白抗體英文名稱:COL20A1 0.2ml
對稱二甲基精氨酸(SMDA)ELISA試劑盒 SMDA ELISA Kit 易感性候選基因5抗體英文名稱:CASC5 0.2ml
對氨基苯甲酸(PABA)ELISA試劑盒 PABA ELISA Kit 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體英文名稱:CAMKK2 0.1ml
端粒重復序列結(jié)合因子2(TERF2)ELISA試劑盒 TERF2 ELISA Kit 中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體英文名稱:Centaurin gamma 1 0.2ml
端粒重復序列結(jié)合因子1(TERF1)ELISA試劑盒 TERF1 ELISA Kit 細胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體英文名稱:CDCA7L 0.2ml
端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)ELISA試劑盒 TERT ELISA Kit 半胱胺酸蛋白酶-2抗體英文名稱:Caspase 2 0.1ml
端粒酶(TE)ELISA試劑盒 TE ELISA Kit 7號染色體開放閱讀框63抗體英文名稱:C7orf63 0.2ml
端粒保護蛋白1(POT1)ELISA試劑盒 POT1 ELISA Kit CD2結(jié)合蛋白3抗體英文名稱:CD2BP3 0.2ml
毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒 M-AChR M3 ELISA Kit 膠原三股螺旋重復蛋白1抗體英文名稱:CTHRC1 0.2ml
毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒 M-AChR ELISA Kit 20號染色體開放閱讀框72抗體英文名稱:c20orf72 0.2ml
毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA試劑盒 TSST-1 ELISA Kit 2號染色體開放閱讀框6抗體英文名稱:C2orf6 0.2ml
疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒 AZT ELISA Kit CD318抗體英文名稱:CDCP1 0.2ml
凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA試劑盒 BIRC4/API3 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框111抗體英文名稱:C1ORF111 0.2ml
凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 AIF ELISA Kit 著絲粒蛋白B抗體英文名稱:CENPB 0.2ml
50T脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測試劑盒250次 植物RNAout Plant RNAOUT 4℃保存
50次 柱式植物RNAout Column Plant RNAOUT 4℃保存
50次 柱式植物RNAout 2.0 Column Plant RNAOUT 2.0 4℃保存(DNase需要-20℃保存)
5次 大提柱式植物RNAout Maxi Column Plant RNAOUT 4℃保存
50次 柱式植物RNA-DNA雙提試劑盒
50次 柱式藻類RNAout Column Algal RNAOUT 4℃保存
5次 大提柱式藻類RNAout
50次 土壤RNAout Soil RNAOUT 4℃保存
50次 柱式土壤RNAout Column Soil RNAOUT 4℃保存
50次 RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存
250次 RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存
50次 白色RNAout
50次 柱式RNAout Column Fungal RNAOUT 4℃保存