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注意事項(xiàng):
服務(wù)流程:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
50T類志賀鄰單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒
50T
BH-P63460
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
方法
OX40配體(OX40L)ELISA試劑盒 OX40L ELISA Kit 10號(hào)染色體開放閱讀框81抗體英文名稱:C10orf81 0.2ml
OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒 OJ/IleRS ELISA Kit 19號(hào)染色體開放閱讀框47抗體英文名稱:C19orf47 0.2ml
N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒 AcSDKP ELISA Kit 19號(hào)染色體開放閱讀框54抗體英文名稱:C19orf54 0.2ml
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 NAG ELISA Kit N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1抗體英文名稱:C1GALT1 0.2ml
N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)ELISA試劑盒 NMDAR ELISA Kit 19號(hào)染色體開放閱讀框18抗體英文名稱:C19orf18 0.2ml
N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒 N-Cad ELISA Kit 19號(hào)染色體開放閱讀框21抗體英文名稱:C19orf21 0.2ml
N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒 N-MID-OT ELISA Kit 19號(hào)染色體開放閱讀框24抗體英文名稱:C19orf24 0.2ml
N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒 Ext-N ELISA Kit Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體英文名稱:Collagen alpha-1(II) chain 0.1ml
N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 NT-proBNP ELISA Kit 皮質(zhì)素1抗體英文名稱:Cortexin 1 0.2ml
NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA試劑盒 Nogo-A Ab ELISA Kit 8號(hào)染色體開放閱讀框70抗體英文名稱:C8orf70 0.2ml
NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 NLR ELISA Kit 胰羧肽酶E抗體英文名稱:Carboxypeptidase H 0.2ml
NADPH氧化酶3(NOX3/MOX2)ELISA試劑盒 NOX3/MOX2 ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體英文名稱:phospho-CK18(Ser60) 0.1ml
Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒 NHE3 ELISA Kit 10號(hào)染色體開放閱讀框88抗體英文名稱:C10orf88 0.2ml
NADPH氧化酶1(NOX1/MOX1/NOH1)ELISA試劑盒 NOX1/MOX1/NOH1 ELISA Kit 20號(hào)染色體開放閱讀框112抗體英文名稱:C20orf112 0.2ml
50T類志賀鄰單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒25uL Cy5-dCTP溶液 (10 mM) Cy5-dCTP Solution -20℃保存
10次 柱式探針純化試劑盒 Column Probe Purification Kit 常溫
10mL Sephadex G50介質(zhì)
5次 超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒A(硝酸纖維素膜) Rapid Nucleic Acid Blotting Kit 常溫
5次 超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒B(尼龍膜) Rapid Nucleic Acid Blotting Kit 常溫
100mL 核酸印跡膜染液 Nucleic Acid Membrane Stain 常溫
100mL 超級(jí)雜交液A(不含甲酰胺) SuperHyb Solution -20℃保存
100mL 超級(jí)雜交液B(含甲酰胺) SuperHyb Solution -20℃保存
10mL 超級(jí)雜交液(Oligo探針) SuperHyb Solution for Oligo -20℃保存
10mL 超級(jí)雜交液(芯片) SuperHyb Solution for Chip -20℃保存
10mL 超級(jí)雜交液(原位雜交) SuperHyb Solution for ISH -20℃保存
10mL DNA探針變性液 DNA Probe Denaturation Solution 常溫
100mL SSC溶液,20× SSC, 20× 常溫
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 P21 ELISA Kit 10號(hào)染色體開放閱讀框47抗體英文名稱:C10orf47 0.2ml