原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

產(chǎn)品名稱：50T腸出血性大腸桿菌 O104:H4 PCR檢測試劑盒

貨號：BH-P63473
規(guī)格：50T
分類：熒光 PCR 法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；本公司產(chǎn)品僅于科研。
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括優(yōu)良定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點優(yōu)勢：
1.  特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
 6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
CD146分子(CD146)ELISA試劑盒  CD146 ELISA Kit  結合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體英文名稱：CITED1 0.2ml

CD134分子(CD134)ELISA試劑盒  CD134 ELISA Kit  Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體英文名稱：Collagen II 0.1ml

CD117分子(CD117)ELISA試劑盒  CD117 ELISA Kit  CSMD2蛋白抗體英文名稱：CSMD2 0.2ml

CD10分子(CD10)ELISA試劑盒  CD10 ELISA Kit  CSMD3蛋白抗體英文名稱：CSMD3 0.2ml

CC趨化因子受體7(CCR7)ELISA試劑盒  CCR7 ELISA Kit  鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶CSTP1抗體英文名稱：CSTP1 0.2ml

CC趨化因子受體5(CCR5)ELISA試劑盒  CCR5 ELISA Kit  CTAGE6蛋白抗體英文名稱：CTAGE6 0.2ml

CC趨化因子受體2(CCR2)ELISA試劑盒  CCR2 ELISA Kit  皮膚T細胞瘤相關抗原4抗體英文名稱：CTAGE4 0.2ml

CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒  CCR1 ELISA Kit  膜蛋白CLDND2抗體英文名稱：CLDND2 0.2ml

CC趨化因子7(CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)ELISA試劑盒  CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7 ELISA Kit  含半胱氨酸和組氨酸豐富域蛋白1抗體英文名稱：CHORDC1 0.2ml

CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)ELISA試劑盒  CCL5/D17S136E/SCYA5 ELISA Kit  豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白英文名稱：capsid protein 0.2ml

CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒  C/EBPε ELISA Kit 肽CAMP抗體英文名稱：Cathelicidin 0.1ml

CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒  C/EBPδ ELISA Kit  卷曲螺旋結構域蛋白134抗體英文名稱：CCDC134 0.2ml

CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒  C/EBPα ELISA Kit  卷曲螺旋結構域蛋白69抗體英文名稱：CCDC69 0.2ml

Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)ELISA試劑盒  KCNN2 ELISA Kit  卷曲螺旋結構域蛋白70抗體英文名稱：CCDC70 0.2ml

cAMP反應元件結合蛋白(CREB)ELISA試劑盒  CREB ELISA Kit  卷曲螺旋結構域蛋白98抗體英文名稱：CCDC98 0.2ml

50T腸出血性大腸桿菌 O104:H4 PCR檢測試劑盒40uL×4 雙脫氧dNTP溶液（10mM） ddNTP Solution -20℃保存

100次 dNTP和引物**劑 dNTP-Primer Erasol -20℃保存

10mL PCR Mix染料 PCR Mix Dye -20℃保存

0.3mL 可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑 Taq DNA Polymerase Inhibitor -20℃保存

500U Taq酶抗體 Taq Antibody -20℃保存

30次 DNA 修復混合液  DNA Repair Mix -20℃保存

150次 DNA 修復混合液  DNA Repair Mix -20℃保存

100次 即用型PCR試劑盒2.0  Instant PCR Kit 2.0 -20℃保存

600次 即用型PCR試劑盒2.0  Instant PCR Kit 2.0 -20℃保存

0.5mL 探針標記專用PCR Mix   

1mL 2X PCR Mix（即用型PCR試劑盒3.0） Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存

9 mL 2X PCR Mix（即用型PCR試劑盒3.0） Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存

1.5mL 2X HotStart PCR Mix(即用型熱啟動PCR試劑盒) Instant Hotstart PCR Mix -20℃保存

技術原理:
       DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。