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它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
服務(wù)流程:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
50T豬藍(lán)耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR檢測(cè)試劑盒
50T
BH-P63882
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
注意事項(xiàng):
白介素17C(IL17C)ELISA試劑盒 IL17C ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白5抗體英文名稱:IFIT5 0.2ml
白介素17(IL17)ELISA試劑盒 IL17 ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白2抗體英文名稱:IFITM2 0.2ml
白介素16(IL16)ELISA試劑盒 IL16 ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白5抗體英文名稱:IFITM5 0.2ml
白介素15(IL15)ELISA試劑盒 IL15 ELISA Kit 干擾素alpha/beta 受體1蛋白抗體英文名稱:phospho-IFNAR1(Tyr466) 0.1ml
白介素13(IL13)ELISA試劑盒 IL13 ELISA Kit 干擾素gamma受體1蛋白抗體英文名稱:phospho-IFNGR1 (Tyr457) 0.1ml
白介素12受體β2(IL2Rβ2)ELISA試劑盒 IL2Rβ2 ELISA Kit 真核翻譯起始因子3亞基L蛋白抗體英文名稱:IF3EI 0.2ml
白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒 IL12B ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白2抗體英文名稱:IFIT2 0.2ml
白介素12A(IL12A)ELISA試劑盒 IL12A ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1B抗體英文名稱:IFIT1B 0.2ml
白介素12(IL12)ELISA試劑盒 IL12 ELISA Kit 160kDa內(nèi)含子結(jié)合蛋白抗體英文名稱:IBP160 0.2ml
白介素11受體α(IL11Rα)ELISA試劑盒 IL11Rα ELISA Kit Bruton酪氨酸激酶抑制劑蛋白抗體英文名稱:IBTK 0.2ml
白介素11(IL11)ELISA試劑盒 IL11 ELISA Kit γ干擾素誘導(dǎo)蛋白IP30抗體英文名稱:IFI30 0.2ml
白介素10受體α(IL10Rα)ELISA試劑盒 IL10Rα ELISA Kit 中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體英文名稱:IFFO 0.2ml
白喉素合酶(DPH5)ELISA試劑盒 DPH5 ELISA Kit 胰島素受體β抗體英文名稱:Insulin receptor subunit beta 0.1ml
白介素10(IL10)ELISA試劑盒 IL10 ELISA Kit 內(nèi)臟器官發(fā)育轉(zhuǎn)位相關(guān)蛋白NPH2抗體英文名稱:Inversin 0.2ml
50T豬藍(lán)耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR檢測(cè)試劑盒2 ug pRAV-flag pRAV-flag 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pBaBe-puro pBaBe-puro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRC pRC 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRC/CMV pRC/CMV 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRetro-Off pRetro-Off 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRetro-On pRetro-On 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRetro-on-EGFP pRetro-on-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRetro-on-RFP pRetro-on-RFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRetroX-IRES-DsRedExpress pRetroX-IRES-DsRedExpress 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRetroX-IRES-ZsGreen1 pRetroX-IRES-ZsGreen1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pREV pREV 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRevTet-Off pRevTet-Off 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pRevTet-On pRevTet-On 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
白介素17D(IL17D)ELISA試劑盒 IL17D ELISA Kit 干擾素誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白3抗體英文名稱:IFIT3 0.2ml