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原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T馬動(dòng)脈炎病毒(EAV)PCR檢測試劑盒
貨號(hào):BH-P63937
規(guī)格:50T
分類:熒光-PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
ⅩⅦ型膠原(COL17)ELISA試劑盒 COL17 ELISA Kit 微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體英文名稱:LC3C 0.2ml
ⅩⅤ型膠原(COL15)ELISA試劑盒 COL15 ELISA Kit 假定抑制亮氨酸拉鏈蛋白1抗體英文名稱:LZTS1 0.2ml
ⅩⅣ型膠原(COL14)ELISA試劑盒 COL14 ELISA Kit 乳酸脫氫酶LDH-C(/睪抗原32)抗體英文名稱:LDHC(Cancer,testis antigen 32) 0.1ml
ⅩⅢ型膠原(COL13)ELISA試劑盒 COL13 ELISA Kit 抑制基因LUCA15抗體英文名稱:LUCA15 0.2ml
Ⅷ型膠原α1(COL8α1)ELISA試劑盒 COL8α1 ELISA Kit 細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體英文名稱:LST1 0.2ml
Ⅶ型膠原(COL7)ELISA試劑盒 COL7 ELISA Kit RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體英文名稱:LEO1 0.1ml
Ⅵ型膠原α3(COL6α3)ELISA試劑盒 COL6α3 ELISA Kit 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體英文名稱:Phospho-LRP6(Thr1479) 0.1ml
Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒 COL6α1 ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞特異性蛋白酪氨酸激酶抗體英文名稱:phospho-LCK(Tyr394) 0.1ml
Ⅴ型膠原α2(COL5α2)ELISA試劑盒 COL5α2 ELISA Kit 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體英文名稱:LRP5 0.1ml
Ⅳ型膠原α3(COL4α3)ELISA試劑盒 COL4α3 ELISA Kit 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體英文名稱:phospho-LRP5(Thr1492) 0.1ml
Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒 COL4α1 ELISA Kit 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體英文名稱:phospho-LRP1(Ser4523) 0.1ml
Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒 COL4 ELISA Kit 蘇氨酸蛋白激酶LKB1抗體英文名稱:LKB1 0.1ml
ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)ELISA試劑盒 PLA2G4D ELISA Kit 低分子量蛋白7抗體英文名稱:LMP7 0.2ml
Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 PⅢNP ELISA Kit 層粘連蛋白β4抗體英文名稱:Laminin subunit beta-4 0.2ml
Ⅲ型前膠原羧基端原肽(PⅢCP)ELISA試劑盒 PⅢCP ELISA Kit 脂肪瘤相關(guān)蛋白抗體英文名稱:LIM protein 0.1ml
50T馬動(dòng)脈炎病毒(EAV)PCR檢測試劑盒250mL MES Buffer,0.2M,pH5.5 MES Buffer,0.2M,pH5.5 常溫保存
250mL MES Buffer,0.2M,pH6.0 MES Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存
250mL MES Buffer,0.2M,pH6.5 MES Buffer,0.2M,pH6.5 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH5.0 MES Buffer,0.5M,pH5.0 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH5.5 MES Buffer,0.5M,pH5.5 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH6.0 MES Buffer,0.5M,pH6.0 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH6.5 MES Buffer,0.5M,pH6.5 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH7.0 MES Buffer,0.5M,pH7.0 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH7.4 MES Buffer,0.5M,pH7.4 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH8.0 MES Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH8.5 MES Buffer,0.5M,pH8.5 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH9.0 MES Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存
250mL MES Buffer,1.0M,pH5.0 MES Buffer,1.0M,pH5.0 常溫保存
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。