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原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱(chēng):50T異嗜性白血病病毒(X-MuLV)核酸檢測(cè)
貨號(hào):BH-P63943
規(guī)格:50T
分類(lèi):熒光-PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
20S-蛋白酶體(20S-PSM)ELISA試劑盒 20S-PSM ELISA Kit 絲裂原活化蛋白激酶13抗體英文名稱(chēng):MAPK13 0.2ml
205kDa核孔蛋白(NUP205)ELISA試劑盒 NUP205 ELISA Kit 多纖毛素蛋白抗體英文名稱(chēng):Multicilin 0.2ml
2',5'-寡腺苷酸合成酶3(OAS3)ELISA試劑盒 OAS3 ELISA Kit 肌管素相關(guān)蛋白8抗體英文名稱(chēng):MTMR8 0.2ml
2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)ELISA試劑盒 OAS2 ELISA Kit 巨噬細(xì)胞甘露糖受體2抗體英文名稱(chēng):MRC2 0.1ml
2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA試劑盒 OAS1 ELISA Kit 細(xì)胞周期G1的相互作用蛋白抗體英文名稱(chēng):MNAT1 0.2ml
2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)ELISA試劑盒 2,3-BPG ELISA Kit 主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體英文名稱(chēng):MAML3 0.2ml
188kDa核孔蛋白(NUP188)ELISA試劑盒 NUP188 ELISA Kit 絲裂原活化蛋白激酶MKK3抗體英文名稱(chēng):MEK3 0.1ml
17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 17-OHP ELISA Kit MYSM1抗體英文名稱(chēng):MYSM1 0.1ml
17-β-羥基類(lèi)固醇脫氫酶3(HSD17β3)ELISA試劑盒 HSD17β3 ELISA Kit 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體英文名稱(chēng):MCT1 0.2ml
17-α-羥化酶(S17αH)ELISA試劑盒 S17αH ELISA Kit 微管相關(guān)蛋白1A抗體英文名稱(chēng):MAP1A 0.1ml
160kDa核孔蛋白(NUP160)ELISA試劑盒 NUP160 ELISA Kit 中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體英文名稱(chēng):Midkine 0.1ml
15-羥基前列腺素脫氫酶(HPGD)ELISA試劑盒 HPGD ELISA Kit 鹽皮質(zhì)受體抗體英文名稱(chēng):Mineralocorticoid receptor 0.2ml
155kDa核孔蛋白(NUP155)ELISA試劑盒 NUP155 ELISA Kit 促黑細(xì)胞α抗體英文名稱(chēng):alpha MSH 0.1ml
133kDa核孔蛋白(NUP133)ELISA試劑盒 NUP133 ELISA Kit 細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體英文名稱(chēng):ASK1 0.1ml
153kDa核孔蛋白(NUP153)ELISA試劑盒 NUP153 ELISA Kit Myc基因相關(guān)X因子抗體英文名稱(chēng):MAX protein 0.1ml
50T異嗜性白血病病毒(X-MuLV)核酸檢測(cè)250mL Para-formaldehyde in PBS with Mg++ and EGTA,4% Para-formaldehyde in PBS with Mg++ and EGTA,4% 常溫保存
250mL Para-formaldehyde in Phosphate Buffer Para-formaldehyde in Phosphate Buffer 常溫保存
250mL Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in Bicarbonate Buffer Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in Bicarbonate Buffer 常溫保存
250mL Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in PBS Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in PBS 常溫保存
250mL Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in Phosphate Buffer Para-formaldehyde-Glytaraldehyde in Phosphate Buffer 常溫保存
250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X 常溫保存
250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.2,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.2,2X 常溫保存
250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X 常溫保存
100mL PBS-EDTA Solution,5X PBS-EDTA Solution,5X 常溫保存
500mL PBS-Tween-20 Solution,10X PBS-Tween-20 Solution,10X 常溫保存
1000mL PBS-Tween-20 Solution,20X PBS-Tween-20 Solution,20X 常溫保存
100mL PEG 3350 Solution,50% PEG 3350 Solution,50% 常溫保存
250mL PEG-LiOAc Solution PEG-LiOAc Solution 常溫保存
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。