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ELISA檢測概述
ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱:人ⅩⅤ型膠原(COL15)ELISA試劑盒步驟
英文名稱:Human Collagen Type XV(COL15)ELISA Kit
貨號:PH103561
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國家承認(rèn)的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
注意事項:
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時,可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?br>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
蒼術(shù)素醇 2,8-Nonadiene-4,6-diyn-1-ol 20mg
骨化二醇 Calcifediol 20mg
骨化三醇 Calcifediol 10mg
雷帕霉素 Sirolimus 20mg
他克莫司 Tacrolimus 20mg
硫秋水仙苷 Acetamide 20mg
小檗紅堿 Berberrubine 20mg
非洲防己堿 Columbamine 10mg
佛司可林 Forskolin 20mg
山茱萸新苷 Cornuside 10mg
蠶豆苷 Vicine 20mg 泛酸激酶3抗體
蛋白酶激活受體4抗體
腫瘤抑制基因p53抗體
早老素γ分泌酶2抗體
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PIM3抗體
組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體
泛素連接酶抗體
腫瘤錯配修復(fù)基因PMS1抗體
原鈣粘蛋白γA7抗體
原鈣粘蛋白γA8抗體
原鈣粘蛋白γA11抗體
原鈣粘蛋白γA9抗體
原鈣粘蛋白γA12抗體
人ⅩⅤ型膠原(COL15)ELISA試劑盒步驟MCPIP1 單核細(xì)胞趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體 0.2ml
肌腱蛋白M4(TENM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tenascin M4 (TENM4) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
DCC 結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體 0.1ml
Tsukushin蛋白(TSK)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tsukushin (TSK) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
DP-II 橋粒斑蛋白2抗體 0.2ml
Erlectin 1蛋白(ERLEC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Erlectin 1 (ERLEC1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
ITGB4 整合素β4抗體 0.1ml
磷脂酶D3(PLD3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phospholipase D3 (PLD3) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 0.2ml
基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白8(MXRA8)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Remodelling Associated Protein 8 (MXRA8) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
FGF20 成纖維細(xì)胞生長因子20抗體 0.2ml
腦啡肽酶2(NEP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neprilysin 2 (NEP2) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
公司產(chǎn)品優(yōu)勢:
1,全:公司提供上萬種產(chǎn)品,涵蓋了生物試劑,elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,培養(yǎng)基,原裝耗材等,基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
2,新:產(chǎn)品更新速度較快,基本上每周都有新產(chǎn)品出現(xiàn)。
3,優(yōu):產(chǎn)品質(zhì)量好,零投訴。
4,品牌多:公司代理的試劑品牌:Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等進(jìn)口品牌,國產(chǎn)品牌我們價格更優(yōu),我們供應(yīng)優(yōu)級純,分析純,化學(xué)純,試劑級,基準(zhǔn)試劑,實(shí)驗(yàn)純,教學(xué)試劑,高純試劑,色譜純,光譜純,電子純等試劑級別(可根據(jù)客戶需求定制)。
5,售后:我公司具有上等的技術(shù)團(tuán)隊,產(chǎn)品一旦售出,產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時沒有任何的后顧之憂。