試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
6-喹喔啉分子式：145.16分子量： C8H7N3英文名稱：Aminoquinoxaline 6-CAS號：6298-37-9

十二氯三鈦鋁分子式：596.12分子量： AlCl12Ti3英文名稱：Twelve chlorine three titaniumCAS號：12003-13-3

乙二丁英文名稱：Ethylene glycol butyl etherCAS號：111-76-2分子式：118.17分子量： C6H14O2

2,6-二溴萘分子式：285.96分子量： C10H6Br2英文名稱：2,6- dibromine naphthaleneCAS號：13720-06-4

粘液洋紅英文名稱：Mucus magentaCAS號：51395-97-2分子式：分子量：

4,4',4',4'-四叔丁酞菁銅英文名稱：4,4 ', 4', 4 '- Tetra tert butyl phthalocyanine copperCAS號：39001-64-4分子式：800.51分子量： C48H48CuN8

土荊皮乙英文名稱：Soil Jing acidCAS號：82508-31-4分子式：432.464分子量：C23H28O8

草酸三氫鉀分子式：254.19分子量： KH3C4O8 · 2H2O； KH3(C2O英文名稱：Potassium oxalate threeCAS號：6100-20-5-

聚丙英文名稱：PolypropyleneCAS號：9003-07-0分子式：42.08分子量： [C3H6]n

吡嘧司特鉀分子式：266.3分子量： C10H7KN6O英文名稱：Pemirolast potassiumCAS號：100299-08-9狗 CXCL17 基因全長ORF克隆

狗 CXCL17 基因全長ORF克隆

人 PROM1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標(biāo)簽

人 IK 基因全長ORF克隆

人 PNLIPRP2 基因全長ORF克隆

人 Cystatin S / CST4 ELISA配對抗體

小鼠 CCR3 基因全長ORF克隆

重組人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白

人 M6PR 基因全長ORF克隆

大鼠 CLPS 基因全長ORF克隆

人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 ME2 基因全長ORF克隆

小鼠活化素B(ACV-B)博湖ELISA試劑盒Rabbit Anti-Goat IgM  兔抗羊IgM 1mg

Kruppel樣因子2(KLF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Kruppel Like Factor 2, Lung (KLF2)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Goat Anti-Mouse IgM/PE  PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白C6(ABCC6)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter C6 (ABCC6)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Goat Anti-human IgG/PE  PE標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml

神經(jīng)正五聚蛋白受體(NPTXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Neuronal Pentraxin Receptor (NPTXR)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

CD5抗原樣蛋白(CD5L)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for CD5 Antigen Like Protein (CD5L)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Rabbit Anti-Biotin/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml

脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte (FABP4)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Rabbit Anti-Goat IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml

趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 1 (CCL1)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)