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ELISA檢測概述
ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱:小鼠黃體**素(LH)ELISA試劑盒步驟
英文名稱:Mouse luteinizing hormone,LH ELISA kit
貨號:PM104213
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn),已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?br>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
酞菁藍B英文名稱:Phthalocyanine blue BCAS號:147-14-8分子式:576.08分子量: C32H16CuN8
丹參酚A英文名稱:Salvia miltiorrhiza phenolic acid ACAS號:96574-01-5分子式:494.447分子量:C26H22O10
堿性品紅英文名稱:FuchsinCAS號:632-99-5分子式:337.85分子量: C20H20ClN3
羥吳茱萸堿英文名稱:HydroxyevodiamineCAS號:1238-43-3分子式:319.35718分子量:C19H17N3O2
3,4,7,8-四甲-1,10-菲羅啉分子式:236.32分子量: C16H16N2英文名稱:3,4,7,8- four methyl -1,10-CAS號:1660-93-1
鉬酸鉀分子式:238.13分子量: K2MoO4英文名稱:Potassium molybdateCAS號:13446-49-6
2,5-二三氟甲分子式:176.14分子量: C7H7F3N2英文名稱:2,5- two amino three fluorine tolueneCAS號:364-13-6
6-溴-4,4'-二甲-2,2'-雙吡分子式:263.14分子量: C12H11BrN2英文名稱:6- two -2,2'-CAS號:850413-36-4
5-溴-2,3-二羥吡分子式:190分子量: C5H4BrNO2英文名稱:5- two hydroxy pyridine -2,3-CAS號:34206-49-0
直接耐曬黃5GL英文名稱:Direct fast yellow 5GLCAS號:10190-68-8分子式:662.62分子量: C25H20N4Na2O9S3食蟹猴 BTLA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
食蟹猴 BTLA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 標簽)
甲型流感 H5N1 (Goose/Guangdong/1/96) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 無標簽
人 LRRN1 基因全長ORF克隆
大鼠 F3 基因全長ORF克隆
重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標簽)
人 LPHN1 基因全長ORF克隆
人 FAAH2 基因全長ORF克隆
人 IL21 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 IL1R1 / CD121a ELISA配對抗體
小鼠黃體**素(LH)ELISA試劑盒步驟GSK-3 Beta (CT) 葡萄糖合成激酶-3β抗體 0.1ml
含STIP1同源物U-框蛋白1(STUB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for STIP1 Homology And U-Box Containing Protein 1 (STUB1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
HGF 肝細胞生長因子抗體 0.1ml
組織蛋白酶Z(CTSZ)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin Z (CTSZ) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
HPCL2 植烷酰輔酶A羥化酶2抗體 0.2ml
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
IGFBP7 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7抗體 0.2ml
妊關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Pregnancy Associated Plasma Protein A (PAPPA) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
IL-6 白介素6抗體 0.1ml
細胞周期素D2(CCND2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin D2 (CCND2) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
phospho-Ep300 (Ser89) 磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 0.1ml
M2-型丙酮酸激酶(PKM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Muscle (PKM2) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
公司產(chǎn)品優(yōu)勢:
1,全:公司提供上萬種產(chǎn)品,涵蓋了生物試劑,elisa試劑盒,標準品,培養(yǎng)基,原裝耗材等,基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
2,新:產(chǎn)品更新速度較快,基本上每周都有新產(chǎn)品出現(xiàn)。
3,優(yōu):產(chǎn)品質(zhì)量好,零投訴。
4,品牌多:公司代理的試劑品牌:Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等進口品牌,國產(chǎn)品牌我們價格更優(yōu),我們供應(yīng)優(yōu)級純,分析純,化學(xué)純,試劑級,基準試劑,實驗純,教學(xué)試劑,高純試劑,色譜純,光譜純,電子純等試劑級別(可根據(jù)客戶需求定制)。
5,售后:我公司具有上等的技術(shù)團隊,產(chǎn)品一旦售出,產(chǎn)品僅用于科研實驗過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時沒有任何的后顧之憂。