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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:小鼠組織蛋白酶G(CTSG)博湖ELISA試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):PM104686
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
小鼠組織蛋白酶G(CTSG)博湖ELISA試劑盒檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
詳情介紹:

我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

小鼠組織蛋白酶G(CTSG)博湖ELISA試劑盒

英文名稱

Mouse Cathepsin G(CTSG)ELISA Kit

貨號(hào)

PM104686

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。


樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2-甲-5-丙酰分子式:138.16分子量: C8H10O2英文名稱:2- methyl -5-CAS號(hào):10599-69-6

(5,5-二甲-1,3,2-二氧代硼雜-2-)分子式:190.05分子量: C11H15BO2英文名稱:(5,5- two -1,3,2- two, -2- based) benzeneCAS號(hào):5123-13-7

2-甲-3,4,5,6-四甲氧溴分子式:291.14分子量: C11H15BrO4英文名稱:2- methyl -3,4,5,6- tetramethoxyl BromophenylCAS號(hào):73875-27-1

4--7-硝-2,1,3-并氧雜惡二英文名稱:4-, -7-,, -2,1,3-, nitro group, and twoCAS號(hào):90421-78-6分子式:195.14分子量: C6H7N5O3N

2-氯-6-甲氧-4-吡甲醛分子式:171.58104分子量: C7H6ClNO2英文名稱:2- -6-, -4-, formaldehydeCAS號(hào):329794-31-2

1,5-萘分子式:130.15分子量: C8H6N2英文名稱:1,5- naphthaleneCAS號(hào):254-79-5

4-甲硫酸氫氯酸嘧分子式:221.7分子量: C8H12ClNO2S英文名稱:4- methyl benzyl sulfateCAS號(hào):4393-16-2

碳酸鈷分子式:118.94分子量: CCoO3英文名稱:Cobalt carbonateCAS號(hào):513-79-1

2,6-二甲-3-羥吡分子式:123.15分子量: C7H9NO英文名稱:2,6- two methyl -3- hydroxy pyridineCAS號(hào):1122-43-6

4--2-甲吡分子式:108.14分子量: C6H8N2英文名稱:4- amino -2- methyl pyridineCAS號(hào):18437-58-6小鼠 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對(duì)抗體

小鼠 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對(duì)抗體

甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

 ESAM 基因全長ORF克隆

大鼠 RPL10 基因全長ORF克隆

 FCN1 基因全長ORF克隆

Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-LRPAP1 Immunomagnetic Beads IP    5 mL

 CA9 / CAIX 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

 FGL1 基因全長ORF克隆

 PPM1G 基因全長ORF克隆

大鼠 MMP-9 / CLG4B 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

大鼠 JAM-A / F11R 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

小鼠組織蛋白酶G(CTSG)博湖ELISA試劑盒活化復(fù)制因子1 ATF1 (Activating Transcription Factor1) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:  0.5mg

腎近曲小管上皮細(xì)胞總RNA 規(guī)格:  10 μg   英文名稱:  HRPTEpiC tRNA

神經(jīng)激肽B(抗原) NKB (Neurokinins B) 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格:  0.5mg

腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNA 規(guī)格:  10 μg   英文名稱:  HRCEpiC tRNA

活化復(fù)制因子2(多肽) ATF2 (Activating Transcription Factor2) 特價(jià)促銷 規(guī)格:  0.5mg

腎上皮細(xì)胞總RNA 規(guī)格:  10 μg   英文名稱:  HREpiC tRNA

磷酸化活化復(fù)制因子2抗原 phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:  0.5mg

腎系膜細(xì)胞總RNA 規(guī)格:  10 μg   英文名稱:  HRMC tRNA

神經(jīng)激肽-B受體(抗原) NKR ; Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor; NK-4 receptor) 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格:  0.5mg

膀胱平滑肌細(xì)胞總RNA 規(guī)格:  10 μg   英文名稱:  HBdSMC tRNA

活化轉(zhuǎn)錄因子3抗原 ATF3 (Activating Transcription Factor3) 特價(jià)促銷 規(guī)格:  0.5mg

尿道上皮細(xì)胞總RNA 規(guī)格:  10 μg   英文名稱:  HUC tRNA

操作流程:
1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

 

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