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我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)免費代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Cartilage Oligomeric Matrix Protein(COMP)ELISA Kit |
貨號 |
PM105068 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
補骨脂乙素,異補骨脂查爾酮 英文名稱 Isobavachalcone 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 0.97
紅大戟 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
沒食子酸 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
1-甲基海因 英文名稱 供鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
磺胺氯噠嗪 標準品 CAS號:80-32-0 250mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
木蘭花堿 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Magnoflorine chloride
鹽酸嗪 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
兔耳草 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
云南白藥對照品 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
酸克侖特羅 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
咪 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 檢查2,3-dinor Prostaglandin E1 (1 mg)2,3-dinor PGE1, 2,3-dinor Prostaglandin E1, 9-oxo-11.alpha.,15S-dihydroxy-2,3-dinor-prost-13E-en-1-oic acid
噻吩甲酰三氟丙酮Thenoyltrifluoroacetone
Salermide (100 mg)N-[3-[[(2-hydroxy-1-naphthalenyl)methylene]amino]phenyl]-a-methyl-benzeneacetamide; Salermide
Prostaglandin Screening Library II (96-Well) (50 ul)Prostaglandin Compound Screening Library 2
JNJ-1661010 (50 mg)N-phenyl-4-(3-phenyl-1,2,4-thiadiazol-5-yl)-1-pipeazinecarboxamide; JNJ-1661010
Acridinium Labeling Buffer (5 mL)Acridinium Labeling Buffer
Colcemid (10 mg)Demecolcine|NSC 3096; (7S)-6,7-dihydro-1,2,3,10-tetramethoxy-7-(methylamino)-benzo[a]heptalen-9(5H)-one
1-(1,1-Dimethylethyl)-1-(4-methylphenyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-aminePP1
AP-18 (50 mg)4-(4-chlorophenyl)-3-methyl-3-buten-2-one, oxime; AP-18
NU 1025 (5 mg)8-hydroxy-2-methyl-4(3H)-quinazolinone; NSC 696807; NU 1025
Cl-2201 (5 mg)(4-chloro-1-naphthalenyl)[1-(5-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl]-methanone; JWH 398 N-(5-fluoropentyl) analog; Cl-2201
(±)-CP 47,497-C7-hydroxy metabolite (10 mg)5-(8-hydroxy-2-methyloctan-2-yl)-2-((1S,3R)-3-hydroxycyclohexyl)phenol; (±)-CP 47,497-C7-hydroxy metabolite
小鼠軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)免費代測ELISA KitLB肉湯 現(xiàn)貨促銷 250(g)
小鼠一氧化氮()ELISA試劑盒英文名稱:Mouse nitric oxide, ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA Kit,48T/96T
LB瓊脂 特價供應(yīng) 250(g)
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse C-Peptide ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA Kit,48T/96T
玉米粉瓊脂培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250(g)
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T促甲狀腺素(TSH)ELISA Kit,48T/96T
高氏一號合成培養(yǎng)基 特價供應(yīng) 250(g)
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T猴內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
L型細高滲糖增培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250(g)
小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA Kit,48T/96T
L型細高滲鹽增培養(yǎng)基 特價供應(yīng) 250(g)
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA Kit,48T/96T
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。