試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營(yíng)產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè)，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
次野鳶尾黃素 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定

鹽酸羅格列酮 英文名稱 HPLC法含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

止瀉木子 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

胱氨酸 英文名稱 檢查  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

精氨酸 英文名稱 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

續(xù)隨二萜醇 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：

鹽酸小檗胺 英文名稱 Berbamine Hydrochloride  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 98%

雙嘧達(dá)莫 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 檢查

過(guò)氧苯甲酰 英文名稱 鑒別  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

貝母素乙 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定

巢脾 英文名稱 TLC法鑒別  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) MK 0752 （5 mg）cis-4-[（4-chlorophenyl）sulfonyl]-4-（2,5-difluorophenyl）-cyclohexanepropanoic acid

Ganglioside GT1b （sodium salt） （5 mg）Ganglioside G1； Ganglioside GT1b, trisodium salt

JWH 081 3-methoxynaphthyl isomer （5 mg）（3-methoxynaphthalen-1-yl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）methanone； JWH 081 3-methoxynaphthyl isomer

UR- N-heptyl analog （1 mg）（1-heptyl-1H-indol-3-yl）（2，2，3，3-tetramethylcyclopropyl）methanone； UR- N-heptyl analog

Zaltoprofen （5 g）10，11-dihydro-a-methyl-10-oxo-dibenzo[b，f]thiepin-2-acetic acid； CN 100|Soleton； Zaltoprofen

Maltose Standard (300 ul)Maltose Standard

DAX-J2 Ratio 580/460DAX-J2 Ratio 580/460

Agomelatine （50 mg）N-[2-（7-methoxy-1-naphthalenyl）ethyl]-acetamide； Valdoxan ； Agomelatine

Annexin V-mFluor Violet 560偶聯(lián)物Annexin V-mFluor Violet 560 conjugate

Biotinylated Bovine Serum Albumin （Biotin-LC-BSA） （5 biotin/BSA）Biotinylated Bovine Serum Albumin （Biotin-LC-BSA） （5 biotin/BSA）

Nimodipine （1 g）1，4-dihydro-2，6-dimethyl-4-（3-nitrophenyl）-3-（2-methoxyethyl） 5-（1-methylethyl） ester， 3，5-pyridinedicarboxylic acid； Admon|BAY-e 9736|peiplum； Nimodipine

AM580 （1 mg）CD336|NSC 608001|Ro 40-6055； 4-

小鼠類固醇5α還原酶1(SRD5α1)免費(fèi)代測(cè)ELISA KitO157顯色培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 1000ml 用于O157的顯色培養(yǎng)

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒英文名稱：Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen，ⅠCTP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

沙門(mén)氏顯色培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 1000ml 用于沙門(mén)氏的顯色培養(yǎng)

抗甲型肝炎病毒IgG抗體(anti-HAV)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-hepatitis A virus IgG antibody，anti-HAV ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA Kit，48T/96T特價(jià)促銷

李斯特氏顯色培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 1000ml 用于李斯特氏的顯色培養(yǎng)

生長(zhǎng)釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 英文名稱：Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin，GHRP-Ghrelin ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 1000ml 用于金黃色葡萄球的顯色培養(yǎng)

C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒英文名稱：Human C-Peptide ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA Kit，48T/96T特價(jià)促銷

霉和酵母顯色培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 1000ml 用于霉和酵母的顯色培養(yǎng)

白三烯B4(LTB4) ELISA試劑盒英文名稱：Human Leukotriene B4，LT-B4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)進(jìn)口/原裝

弧顯色培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 1000ml 用于弧的顯色培養(yǎng)，副溶血性弧顯藍(lán)色，其它弧顯無(wú)色。

熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒英文名稱：Human heat shock protein 27，HSP-27 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA Kit，48T/96T特價(jià)促銷