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試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse NADH Dehydrogenase, Quinone 1(NQO1)ELISA Kit |
貨號 |
PM105234 |
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
鹽酸阿扎司瓊 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC法含量測定
劍葉龍血素C 英文名稱 Cochinchinenin C 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
鳶尾苷(射干苷) 英文名稱 Tectoridin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
羥基吳茱萸堿 英文名稱 Hydroxyevodiamine 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
庚烷磺酸鈉 英文名稱 / 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
10-羥基喜樹堿 英文名稱 10-Hydroxy camptothecin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥95%
槐定堿 英文名稱 鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
丹皮酚磺酸鈉 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
派可林酸 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
參皂苷Ro 英文名稱 竹節(jié)參苷V 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Ginsenoside Ro
胰島素 英文名稱 標準品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 效價測定SU 6656 (10 mg)2,3-dihydro-N,N-dimethyl-2-oxo-3-[(4,5,6,7-tetrahydro-1H-indol-2-yl)methylene]-1H-indole-5-sulfonamide; SU 6656
Naphthofluorescein (50 mg)3,11-dihydroxy-spiro[7H-dibenzo[c,h]xanthene-7,1’(3’H)-isobenzofuran]-3’-one; CCG 8295; Naphthofluorescein
Arachidonyl Trifluoromethyl Ketone (10 mg)1,1,1-trifluoro-6Z,9Z,12Z,15Z-heneicosatetraen-2-one; AATFMK|ATK; Arachidonyl Trifluoromethyl Ketone
Cysteinyl Leukotriene Affinity Sorbent (1 mL)Cysteinyl Leukotriene Affinity Sorbent
Creatine Kinase Positive Control (10 ug)Creatine Kinase Positive Control
2-[(1-Methylpropyl)dithio]-1H-imidazole; IV-2PX 12
Entacapone (50 mg)2-cyano-3-(3,4-dihydroxy-5-nitrophenyl)-N,N-diethyl-2E-propenamide; Comtan|OR 611; Entacapone
肌醇(1KG)myo-Inositol, CAS# 87-89-8; ≥99%
TAK-632 (50 mg)N-[5-[[7-cyano-2-[(cyclopropylcarbonyl)amino]-6-benzothiazolyl]oxy]-2-fluorophenyl]-3-(trifluoromethyl)-benzeneacetamide
trans-Vaccenic Acid (50 mg)trans-11-Octadecenoic acid; 11E-octadecenoic acid
4-Methylbenzamide oxime (500 mg)N-hydroxy-4-methyl-benzenecarboximidamide; p-Toylamideoxime; 4-Methylbenzamide oxime
C-2 Ceramide (25 mg)N-[(1S,2R,3E)-2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)-3-heptadecen-1-yl]-acetamide; N-Acetylsphingosine; C-2 Ceramide
小鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒TTC營養(yǎng)瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于細總數(shù)測定
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T沙眼衣原體抗體(CT)ELISA Kit,48T/96T
LB肉湯 現(xiàn)貨促銷 250 用于細培養(yǎng)
小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Vitamin B6,VB6 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA Kit,48T/96T
LB營養(yǎng)瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于細培養(yǎng)
大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA Kit,48T/96T
苯丙氨酸脫氨酶培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 100 用于苯丙氨酸脫氨酶試驗
大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit,48T/96T
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 特價供應(yīng) 250 用于大腸桿的熒光檢測(SN標準)
大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA Kit,48T/96T
2216E瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250 用于海生細的培養(yǎng)和計數(shù)
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒英文名稱:Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA Kit,48T/96T