試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br>
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠含銅胺氧化酶3(AOC3)免費(fèi)代測(cè)ELISA Kit |
英文名稱(chēng) |
Mouse Amine Oxidase, Copper Containing 3(AOC3)ELISA Kit |
貨號(hào) |
PM105364 |
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
鹽酸賽洛啉 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
對(duì)乙酰氨基酚 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
佐匹克隆 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
表兒茶素沒(méi)食子酸酯 英文名稱(chēng) ECG 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: (?)-Epicatechin gallate
滿山白 英文名稱(chēng) 中藥對(duì)照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
二氫辣椒素(二氫辣椒堿) 英文名稱(chēng) 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 鑒別
柴胡皂苷d 英文名稱(chēng) 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 含量測(cè)定
雷公藤乙素 英文名稱(chēng) Tripdiolide 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
佛手柑內(nèi)酯 英文名稱(chēng) Bergapten 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥98%
矢車(chē)菊素3-O-葡萄糖苷 英文名稱(chēng) Cyanidin 3-O-glucoside 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥95%
羌活(寬葉羌活) 英文名稱(chēng) TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) TMB (hydrochloride hydrate) (100 mg)3,3’,5,5’-tetramethyl-[1,1’-biphenyl]-4,4’-diamine, dihydrochloride, dihydrate; TMB (hydrochloride hydrate)
鈣離子熒光探針Fluo-3,五鈉鹽Fluo-3, pentasodium salt
2-Linoleoyl Glycerol (5 mg)9Z,12Z-octadecadienoic acid, 2-glyceryl ester; 2-LG; 2-Linoleoyl Glycerol
Reprogramming Cocktail Set II (1000X)StemBoost Reprogramming Cocktail Set II (1000X), Sterile-Filtered
Ganglioside GQ1b (sodium salt) (100 ug)Ganglioside GQ1b, tetrasodium salt
11-dehydro Thromboxane B2 (1 mg)11-keto TXB2|11-dehydro TXB2, 11-dehydro Thromboxane B2, 9α,15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z,13E-dien-1-oic acid
碘化丙啶 超級(jí)純Propidium iodide UltraPure grade
新型鈣離子熒光探針Quest Fluo-8FF, 鉀鹽Quest Fluo-8FF, potassium salt
Estriol AChE Tracer (100 dtn)1,3,5(10)-Estratriene-3,16α,17β-triol|16α-hydroxy-17β-Estradiol|E3; Estriol AChE Tracer
Ciprofloxacin (hydrochloride) (25 g)1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-pipeazinyl)-3-quinolinecarboxylic acid, monohydrochloride; BAY-o 9867|NSC 620634; Ciprofloxacin (hydrochloride)
N-Acetylagmatine (acetate salt) (10 mg)Monoacetylagmatine; N-(4-guanidinobutyl)acetamide acetate
PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent (1 ea)PPARγ (human recombinant); PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent
小鼠含銅胺氧化酶3(AOC3)免費(fèi)代測(cè)ELISA Kit成纖維細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA Kit,48T/96T
卵巢上皮細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA Kit,48T/96T
卵巢成纖維細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)(GC)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat glucocorticoid,GC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit,48T/96T
卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA Kit,48T/96T
內(nèi)膜上皮細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Rat TGF-beta-inducible early response gene-1,TIEG1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA Kit,48T/96T
內(nèi)皮細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T