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我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠骨成型蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Bone Morphogenetic Protein 4(BMP4)ELISA Kit |
貨號(hào) |
PM105398 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
小鼠肺細(xì)胞英文名稱:
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
去氫膽酸鈉/脫氫膽酸鈉/3,7,12-三氧-5β-膽烷酸鈉/Sodium dehydrocholateBR,95%100克國產(chǎn)/進(jìn)口
球型接合酵母 Zygosaccharomyces globiformis頂孢霉 Cephalosporium acremonium
AGS(胃腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
香菇 Lentinula edodes苜蓿中華根瘤
WISH(羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
熒光假單胞 Pseudomonas fluorescens
PATU8988(胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP)
光帽鱗傘 Pholiota nameko熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSIRT2 Direct Fluorophore (1 ea)SIRT2 Direct Fluorophore
2-(2-chlorophenyl)-5,7-dihydroxy-8-[(3S,4R)-3-hydroxy-1-methyl-4-pipeidinyl]-4-chromenone; HMR 1275; L86-8275; NSC 649890Flavopiridol
1-(4-Methoxyphenyl) pipeazine (hydrochloride) (50 mg)1-(4-methoxyphenyl)-pipeazine, dihydrochloride; 4-MeOPP; 1-(4-Methoxyphenyl) pipeazine (hydrochloride)
25H-NBOMe (hydrochloride) RM (1 mg)2;C-H-NBOMe; 2-(2,5-dimethoxyphenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride
D-myo-Inositol-1,4,6-triphosphate -sodium salt) (5 mg)1,4,6-IP3 (sodium salt)|Ins(1,4,6)-P3 (sodium salt), D-myo-Inositol-1,4,6-triphosphate -sodium salt), D-myo-Insitol-1,4,6-tris(dihydrogen phosphate), trisodium salt
AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5 (1 mg)5-(3-(2-iodobenzoyl)-1H-indol-1-yl-2,4,5,6,7-d5)pentanoic acid; AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDaDiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa
MUG[4-基傘型基-β-D-吡喃半乳糖苷] 超級(jí)純MUG [4-Methylumbelliferyl-beta-D-galactopyranoside] UltraPure grade
JWH 018 N-(5-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)(1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)-methanone; JWH 018 N-(5-hydroxypentyl) metabolite
藻紅蛋白R-PE (R-Phycoerythrin)
JWH 122 3-methylnaphthyl isomer (10 mg)(3-methylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 122 3-methylnaphthyl isomer
1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE (500 mg)1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylethanolamine; 1,2-DSPE|1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphoethanolamine; 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE
小鼠骨成型蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞圓弧青霉 Penicillium cyclopium
兔雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒 英文名稱:Rabbit Dihydro testosterone,DHT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA Kit,48T/96T
地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳) Pleurotus sapidus
兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 英文名稱:Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T胰淀粉酶(PAMY)ELISA Kit,48T/96T
鏈孢囊 Streptosporangium sp.天狼星紅染色試劑盒
兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA Kit,48T/96T
大腸細(xì)胞HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系
兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 英文名稱:Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA Kit,48T/96T
普雷恩毛霉 Mucor prainii楊奇青霉 Penicillium janczewskii
大腸桿宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒 英文名稱:Escherichia coli Protein,E.coli P ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T
膠韌革大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
鹿紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒英文名稱:Deer erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T雞脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA Kit,48T/96T
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。