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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠骨成型蛋白10(BMP10)免費代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Bone Morphogenetic Protein 10(BMP10)ELISA Kit |
貨號 |
PM105400 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
去甲斑蟊素規(guī)格:20mg/支;98%
HCCLM3(高轉(zhuǎn)移肝細胞)5×106cells/瓶×2
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum巨大芽胞桿 Bacillus megatium
SS瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于沙門氏和某些志賀氏的選擇性分離培養(yǎng)。(《中華民共和國藥典》2010年版)
豌豆根瘤 Rhizobium leguminosarum植物桿 Lactobacillus plantarum
無雞血清/Sterile Defidrinated Chicken BloodBR100/400毫升國產(chǎn)/進口
漢遜德巴利酵母 Colletotrichum gloeosporioides
MS751(頸表細胞)5×106cells/瓶×2
血平板 規(guī)格: 90mm×20個 用途: 用于營養(yǎng)要求較高的細的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10-2010,GB/T4789.37-2008 ,GB 4789.30-2...
大鼠表皮黑色素細胞完全培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
WPMY-1(正常前列腺基質(zhì)永生化細胞)5×106cells/瓶×2Cyclic GMP AChE Tracer (100 dtn)cGMP AChE Tracer; Cyclic GMP AChE Tracer
5-Chloro-8-hydroxy-7-iodoquinoline, 5-chloro-7-iodo-8-quinolinol; CQClioquinol
APC-iFluor 750 串聯(lián)化合物APC-iFluor 750 Tandem
Tris-Acetate EDTA Stock Solution (50X, pH 8。0) (250 mL)TAE Buffer; Tris-Acetate EDTA Stock Solution (50X, pH 8。0)
L-Arachidonoylcarnitine (chloride) (50 mg)(R)-3-carboxy-2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14-tetraenoyloxy)-N,N,N-trimethylpropan-1-aminium, monochloride
α-Hydroxyglutaric Acid (sodium salt) (50 mg)2-HG|2-Hydroxyglutaric Acid; 2-hydroxy-pentanedioic acid, disodium salt
Eicosapentaenoic Acid methyl ester (100 mg)5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid, methyl ester; EPA methyl ester; Eicosapentaenoic Acid methyl ester
(Z)-2-(Benzo[d]thiazol-2(3H)-ylidene)-2-(2-((-(pyridine-3-yl)ethyl)amino)pyridine-4-yl)acetonitrileAS601245
25I-NBF (hydrochloride) (1 mg)N-(2-fluorobenzyl)-2-(4-iodo-2,5-dimethoxyphenyl)ethanamine, monohydrochloride; 25I-NBF (hydrochloride)
(R)-(+)-Eicosapentaenyl-1 -Hydroxy-2 -Propylamide (10 mg)(R)-(+)-Eicosapentaenyl-1 -Hydroxy-2 -Propylamide, N-((R)-1-hydroxypropan-2-yl)icosa-5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-pentaenamide
Helix Fluor 6-JOE PhosphoramiditeHelix Fluor 6-JOE Phosphoramidite
Ivacaftor (50 mg)Kalydeco|VX 770; N-
小鼠骨成型蛋白10(BMP10)免費代測ELISA Kit苜蓿中華根瘤 Sirhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Elastase ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
NCI-H596(肺腺鱗細胞)紅垂幕菇 Hypholoma cinnabarinum
醛固酮(ALD)ELISA試劑盒英文名稱:human aldosterone,ALD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷
蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensisB16(小鼠黑色素瘤細胞)
蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒英文名稱:Human Protein C ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)進口/原裝
紫色直絲鏈霉 Streptomyces violaceorectus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒英文名稱:Human β catenin,β-Cat ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷
滑膜細胞完全培養(yǎng)基紅曲霉 Monascus anka
CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒英文名稱:Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae高轉(zhuǎn)移肝細胞
多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒英文名稱:Human dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit規(guī)格:96T/48T白細胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷