試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè)，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（高分）英文名稱：PC-12（高分）

大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum葡萄球 Staphylococcus sp.

R2A瓊脂/R2A Agar/R-2A Agar飲用水中導(dǎo)生細(xì)分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

IMR-32(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞)大鼠牙細(xì)胞完全培養(yǎng)基

10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)重組蛋白英文名稱：Recombinant Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)

百脈根根瘤 Rhizobium loti大孢綠僵=金龜子綠僵大孢變種 Metarhizium majarosporae= anisopliae var. majus

HL-7702(肝正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

泡盛曲霉 Aspergillus awamori泡盛曲霉 Aspergillus awamori

293E(胚腎細(xì)胞（EBNA1基因修飾）)5×106cells/瓶×2

呼吸道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL19（R）-hydroxy Prostaglandin B2 （100 ug）9-oxo-15S，19R-dihydroxy-prosta-5Z，8（12），13E-trien-1-oic acid； 19（R）-OH PGB2； 19（R）-hydroxy Prostaglandin B2

BerbenineBerbamine dihydrochloride

16，16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 （100 mg）6，9-dioxo-11。alpha。，15R-dihydroxy-16，16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid； 16，16-dimethyl-6-keto PGE1； 16，16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1

5-Octyl L-glutamate （5 mg）NSC 522645|

Cyclosporin A （100 mg）NSC 290193； cyclosporin A

JWH 122 （exempt preparation） （1 mg）（4-methyl-1-naphthalenyl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）-methanone

96-Well Cover Sheet （5 ea）EIA-Well Cover Sheets； 96-Well Cover Sheet

Butenoyl PAF （50 mg）1-O-hexadecyl-2-O-（2E-butenoyl）-sn-glyceryl-3-phosphocholine； Butenoyl PAF

1，1’，1’’，1’’’-[disulfanediylbis（carbonothioylnitrilo）]tetraethane；Tetraethylthiuram disulfide； is（diethylthiocarbamyoyl）disulfideDisulfiram

Dynasore （10 mg）3-hydroxy-2-[（3，4-dihydroxyphenyl）methylene]hydrazide-2-naphthalenecarboxylic acid； Dynasore

D--麥芽糖一水合物（10KG）D-Maltose， Monohydrate， CAS# 6363-53-7； MW 360.6

Signal Guard HRP偶聯(lián)物穩(wěn)定劑Signal Guard HRP conjugate stabilizer

小鼠肝X受體α(LXRα)免費(fèi)代測(cè)ELISA KitHFT-8810(胎兒胸腺細(xì)胞株)香菇 Lentinula edodes

牛結(jié)核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒英文名稱：Elisa規(guī)格:2*96孔小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA Kit，48T/96T

瑞氏青霉 Penicillium raistrickii5-8F, 高轉(zhuǎn)移鼻咽細(xì)胞系

魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒英文名稱：E2 ELISA 規(guī)格:96T/48T胰島素樣生長因子2受體(IGF-2R)ELISA Kit，48T/96T

刺孢吸水鏈霉 Streptomyces hygrospisus糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒英文名稱：Human Macrophage-Derived Chemokine，MDC ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（未分化）苜蓿中華根瘤

粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒英文名稱：Human mucin-5 subtype B，MUC5B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T犬α干擾素(IFN-α)ELISA Kit，48T/96T 特價(jià)促銷

檸檬形克勒克酵母 Kloeckera apiculataRH-35(大鼠肝細(xì)胞)

Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒英文名稱：Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide，PⅢNP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae屎腸球 Enterococcus faecium

布魯氏抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Human Brucella Antibody IgG，Brucella Ab IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA Kit，48T/96T 特價(jià)促銷