操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測，我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備：
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標準品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確，每次檢測均需做標準曲線。
X線暗盒個國產(chǎn)

NCI-H596(肺腺鱗細胞)5×106cells/瓶×2

炭樣小單孢 Micromonospora carbonacea酸球亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

肝脂酶(LIPC)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)

田菁根瘤 Azorhizobium canlinodans293FT(胚腎細胞)

小鼠艾氏腹水細胞英文名稱：EAC

黑曲霉 Aspergillus niger釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

小鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL

RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞)MDA-MB-436(腺細胞)

衛(wèi)矛醇半固體發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口5-羧基四基羅丹明乙二胺5-TAMRA ethylenediamine

PV9 （hydrochloride） （50 mg）1-phenyl-2-（pyrrolidin-1-yl）octan-1-one， monohydrochloride； PV9 （hydrochloride）

CI-1040EZSolution PD184352

Paroxetine （hydrochloride） （10 mg）（3S，4R）-3-[（1，3-benzodioxol-5-yloxy）methyl]-4-（4-fluorophenyl）-pipeidine， monohydrochloride； BRL 29060A； Paroxetine （hydrochloride）

3-methyl Benzamideoxime （5 g）N-hydroxy-3-methyl-benzenecarboximidamide； m-Tolylamideoxime； 3-methyl Benzamideoxime

JWH 203 （exempt preparation） （1 mg）2-（2-chlorophenyl）-1-（1-pentyl-1H-indol-3-yl）-ethanone

（±）8，9-DHET （100 ug）（±）8，9-dihydroxy-5Z，11Z，14Z-eicosatrienoic acid； （±）8，9-DiHETrE； （±）8，9-DHET

8-Bromoisoquinoline （5 g）8-bromo-isoquinoline

Anacardic Acid （1 mg）2-hydroxy-6-pentadecyl-benzoic acid； 6-pentadecyl Salicylic Acid； Anacardic Acid

Luotonin F （10 mg）2-（3-quinolinylcarbonyl）-4（3H）-quinazolinone

17，20-dimethyl Prostaglandin F1α （10 mg）9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-17S，20-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid； 17，20-dimethyl PGF1α； 17，20-dimethyl Prostaglandin F1α

Anti-Interleukin-2 （human） EIA Strip Plate （5 ea）Anti-Interleukin-2 （human） EIA Strip Plate

小鼠復(fù)制啟動因子1(REPIN1)ELISA試劑盒淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus小鼠皮下結(jié)締組織細胞

亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Leucine amipepridase,LAP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T植物玉米素核苷(ZR)ELISA Kit，48T/96T 進口/分裝

HUVEC, 臍靜脈內(nèi)皮細胞大鼠主動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基

泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒 英文名稱：Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit，48T/96T 進口/國產(chǎn)

蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki狀葡萄球狀亞種 Staphylococcus capitis subsp. capitis

水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T血清總補體(CH50)ELISA Kit，48T/96T 進口/分裝

香菇 Lentinula edodes中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii

假定蛋白LOC677340 ELISA試劑盒英文名稱：human hypothetical protein LOC677340 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠凝血酶受體(TR)ELISA Kit，48T/96T 進口/國產(chǎn)

平滑肌細胞完全培養(yǎng)基LncaP, 前列腺細胞

吖啶橙(AO)ELISA試劑盒英文名稱：Human Acrine Orange,AO ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA Kit，48T/96T 進口/分裝

胎盤絨毛膜細胞完全培養(yǎng)基嗜熱棲熱 Thermus thermophilus

雄結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒英文名稱：Human Androgen Binding Protein,ABP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA Kit，48T/96T進口/國產(chǎn)