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ELISA檢測概述
ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱:大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒步驟
英文名稱:Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit
貨號(hào):PR106401
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動(dòng)植物。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100μL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時(shí),可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
1瓶 CTLA4 Ig-24細(xì)胞株 CTLA4 Ig-24 低溫運(yùn)輸和保存
尼泊金甲 Methylparaben 99-76-3 20mg
500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.6 Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.6 常溫保存
100mg SMT(iNOS抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
山豆根色滿二氫黃酮Ⅰ 23057-55-8 20mg
250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH3.0 Citrate Buffer,0.5M,pH3.0 常溫保存
50次 一步法無內(nèi)質(zhì)粒DNAout One-Step Endo-free Plasmid DNAOUT 常溫保存(溶液A需4℃保存)
慶大霉素(哥倫比亞瓊脂凍干配套試劑) 每支添加于100ml(024061)哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基中用于藥品梭檢測. 10支/盒
1瓶 CRFK細(xì)胞株 CRFK 低溫運(yùn)輸和保存
木蝴蝶苷A Oroxin A 57396-78-8 20mg
500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH7.0 Tricine Buffered Saline,5X,pH7.0 常溫保存
1 g L-Citrulline(NO中間體) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒步驟霍亂弧(O139)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 0.312-20 ng/mL人 HER3 / ErbB3 ELISA配對(duì)抗體
霍亂弧CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL人 Cystatin S / CST4 ELISA配對(duì)抗體
大腸桿通用型(EC-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對(duì)抗體
大腸桿(O157:H7)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 ELISA配對(duì)抗體
出血性大腸桿(EHEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 ELISA配對(duì)抗體
粘附性大腸桿(EAEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 ELISA配對(duì)抗體
侵襲性大腸桿(EIEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL人 CD86 / B7-2 ELISA配對(duì)抗體
產(chǎn)腸性大腸桿(ETEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 0.156-10 ng/mL人 VWC2 ELISA配對(duì)抗體
致病性大腸桿(EPEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 0.156-10 ng/mL人 Tie1 ELISA配對(duì)抗體
單增李斯特(LM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL人 MMP-8 ELISA配對(duì)抗體
公司產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
1,全:公司提供上萬種產(chǎn)品,涵蓋了生物試劑,elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,培養(yǎng)基,原裝耗材等,基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
2,新:產(chǎn)品更新速度較快,基本上每周都有新產(chǎn)品出現(xiàn)。
3,優(yōu):產(chǎn)品質(zhì)量好,零投訴。
4,品牌多:公司代理的試劑品牌:Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等進(jìn)口品牌,國產(chǎn)品牌我們價(jià)格更優(yōu),我們供應(yīng)優(yōu)級(jí)純,分析純,化學(xué)純,試劑級(jí),基準(zhǔn)試劑,實(shí)驗(yàn)純,教學(xué)試劑,高純?cè)噭?,色譜純,光譜純,電子純等試劑級(jí)別(可根據(jù)客戶需求定制)。
5,售后:我公司具有上等的技術(shù)團(tuán)隊(duì),產(chǎn)品一旦售出,產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時(shí)沒有任何的后顧之憂。