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ELISA檢測概述
ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。
產品名稱:5核苷酸酶試劑盒
貨號:BH-0011649
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照國家標準進行生產,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的生產批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
250mL PIPES Buffer,1.0M, pH8.0 PIPES Buffer,1.0M, pH8.0 常溫保存
100mg AMPPD AMPPD 4℃保存
改良Y培養(yǎng)基 Agar Y,Modified 250g
2 ug pIRES-hrGFP-1 (Vitality) pIRES-hrGFP-1 (Vitality) 低溫運輸,-20℃保存
1mL 抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL Antithrombin III Solution 4℃一周內穩(wěn)定
乙酰胺培養(yǎng)基 用于革蘭氏陰性非發(fā)酵特別是綠膿桿的選擇性分離培養(yǎng)。(GB) 250g
5mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷 X-Gluc -20℃保存
羥基積雪草苷 Madecassic acid 34540-22-2 20mg
125mL RIPA Buffer,2X RIPA Buffer,2X 常溫保存
100 mL F12培養(yǎng)基(含10%胎牛血清) Cell Culture Medium -20℃保存
酸化MRS瓊脂(AMRSA) Acidification MRS Agar 250g
2 ug pLenti 6/TR pLenti 6/TR 低溫運輸,-20℃保存
5核苷酸酶試劑盒ELISA Kit for Human KiSS-1 receptor 1.56-100 ng/mL小鼠 Neutrophil Elastase / ELANE / ELA2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人腫瘤轉移抑制基因KISS-1(Metastasis-suppressor KiSS-1)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ELISA Kit for Human Metastasis-suppressor KiSS-1 0.156-10 ng/mL人 PAI-1 / SerpinE1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人酮己糖激酶(Ketohexokinase)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL小鼠 THY1 / CD90 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ELISA Kit for Human Ketohexokinase 0.312-20 ng/mL小鼠 OMD / Osteomodulin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人激肽釋放酶7(KLK 7)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL人 TNFSF11 / RANKL / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ELISA Kit for Human Kallikrein-7 0.312-20 ng/mL人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人角蛋白13(KRT13)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL人 Frizzled-5 / FZD5 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ELISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 13 0.312-20 ng/mL人 IL11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人細胞角蛋白17(KRT-17)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
公司產品優(yōu)勢:
1,全:公司提供上萬種產品,涵蓋了生物試劑,elisa試劑盒,標準品,培養(yǎng)基,原裝耗材等,基本上各種科研所需產品在我司都能找到。
2,新:產品更新速度較快,基本上每周都有新產品出現。
3,優(yōu):產品質量好,零投訴。
4,品牌多:公司代理的試劑品牌:Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等進口品牌,國產品牌我們價格更優(yōu),我們供應優(yōu)級純,分析純,化學純,試劑級,基準試劑,實驗純,教學試劑,高純試劑,色譜純,光譜純,電子純等試劑級別(可根據客戶需求定制)。
5,售后:我公司具有上等的技術團隊,產品一旦售出,產品僅用于科研實驗過程中遇到困難可提供在線技術咨詢。使您使用產品時沒有任何的后顧之憂。