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英文名稱
MM1.r
產品形態(tài)
成瘤細胞 懸浮和輕微的貼壁同時存在
貨號
P-X859
產品分類
人
規(guī)格
1×106
包裝
株
來源
外周血
用途
僅供科研研究使用
細胞特性:
細胞別稱;MM1.r; MM.1R; MM1-R; MM-1R; MM1R; MM1.R(L); MM1.RL
種屬來源;人
年齡性別;女性
組織來源;外周血
生長特性;懸浮和輕微的貼壁同時存在
細胞形態(tài);成瘤細胞
細胞代數;10代以內
背景簡介;該細胞系的母細胞株MM.1是從一位對類固醇療法產生抗藥性的多發(fā)性骨髓瘤患者的外周血中建立的。MM.1R對地塞米松耐藥。近緣細胞系MM.1S也是從MM.1中分離出來的,但對地塞米松敏感。該細胞復蘇后需要兩周左右才能恢復正常生長。
STR位點;Amelogenin:X;CSF1PO:9,14;D1S1656:11,12;D2S441:11;D2S1338:21,22;D3S1358:16,17;D5S818:8,12;D7S820:10,11;D8S1179:14;D10S1248:12,15;D12S391:17,24;D13S317:13;D16S539:12;D18S51:11,16;D19S433:13;D21S11:29,30;D22S1045:10,11;FGA:20,24;Penta D:2.2,9;Penta E:13,15;TH01:7,8;TPOX:8;vWA:15,17
細胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
培養(yǎng)基;1640+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
運輸和保存:
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二、細胞培養(yǎng)操作:
1) 復蘇細胞:將含有 1 mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min,棄去上清液,加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或將細胞懸液加入 6 cm 皿中,加入約 4 mL 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去 消化液,將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細胞消化情況而定) ,然后在顯微鏡下 觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm 條件下離心 4 min,棄去上清液, 用 PBS 清洗一遍,棄盡 PBS,進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度 5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍 存管凍存 1mL 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h 后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產品:
猴谷胱甘肽S轉移酶A1(GSTA1)elisa生化檢測試劑盒 |
cAMP檢測試劑盒 |
GSTA1 ELISA kit |
CA211檢測試劑盒 |
人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa生化檢測試劑盒 |
人非小細胞肺癌相關抗原211(CA211)elisa分析檢測試劑盒 |
DPPⅣELISAKit |
CG ELISA kit |
大鼠視黃醇結合蛋白(RBP)elisa檢測試劑盒 |
猴絨毛膜促性腺(CG)elisa分析檢測試劑盒 |
冰凍切片核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)熒光染色測定試劑盒 |
白細胞介素28受體α抗體 |
果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(FDA)測試盒 |
IL28 Receptor alpha |
蛋白樣品多粘菌素層析法去內試劑盒 |
1號染色體開放閱讀框191抗體 |
小鼠β萘酚(β-naphthol)elisa分析檢測試劑盒 |
C1orf191 |
轉錄因子RPF1抗體 |
膜電位依賴性純化線粒體氧化應激活性氧(ROS)高質熒光測定試劑盒 |
POU6F2 |
大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)elisa檢測試劑盒 |
環(huán)指蛋白217抗體 |
基因檢測試劑盒 |
IBRDC1 |
P選擇素糖蛋白配體1抗體 Anti-PSGL-1/CD162 |
尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗體 Anti-UGP2 |
MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細胞前列腺素F2a受體抗體PGF2αR Anti-PTGFR |
磷酸化轉錄因子SOX9蛋白抗體 Anti-phospho-SOX9(Ser181) |
Goat Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy5 |
PE-CY5標記的羊抗牛IgG H&L |
FOXD4L1蛋白抗體 |