人成骨肉瘤細胞;SAOS-2-LUC

英文名稱	SAOS-2-LUC	產(chǎn)品形態(tài)	上皮細胞樣 貼壁生長
貨號	P-X11327	產(chǎn)品分類	人
規(guī)格	1×106	包裝	株
來源	骨肉瘤、骨	用途	僅供科研研究使用

細胞特性：

細胞別稱；SAOS-2-LUC；人成骨肉瘤細胞-熒光素酶標記；SAOS-2-熒光素酶標記

種屬來源；人

年齡性別；女，11歲

組織來源；骨肉瘤、骨

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

細胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；SAOS-2細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因Saos-2細胞是J. Fogh和G.Trempe分離和鑒定的眾多人腫瘤細胞系中的一種。該病人曾經(jīng)多種，包括RTG. methotrexate, adriamycin vincristine, cytoxan 和 aramycin-C。該細胞在抑制小鼠中不致瘤，但在半固體培養(yǎng)基中形成集落。

生物等級；1

細胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

保藏機構(gòu)；ATCC; CRL-7939 ATCC; HTB-85 DSMZ; ACC-243 ECACC; 89050205

培養(yǎng)基；MCCOYS 5A+15%FBS+1%雙抗+1.0ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

細胞接收后的處理：
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備MEM（推薦iCell-0012）培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細胞培養(yǎng)操作:

1) 復蘇細胞：將含有 1 mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min，棄去上清液，加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓毎麘乙杭尤?6 cm 皿中，加入約 4 mL 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，棄去 消化液，將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細胞消化情況而定) ，然后在顯微鏡下 觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞，裝入無菌離心管中，1000 rpm 條件下離心 4 min，棄去上清液， 用 PBS 清洗一遍，棄盡 PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度 5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍 存管凍存 1mL 細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項:

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。 
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細胞僅供科研使用。 
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

倉鼠脂氧素A4(LXA4)elisa生化檢測試劑盒	糖蛋白富集試劑盒50T
LXA4 ELISA Kit	通用型鴨鼠傷（ST）基因檢測試劑盒
人對氧磷酶(PON)elisa生化檢測試劑盒	總蛋白定量測試盒帶標準；雙縮脲法 100管/96樣 50管/48樣 比色法
PONELISAKit	海洋動物（蝦貝類）線粒體粗提分離試劑盒
P1噬菌體培養(yǎng)試劑盒	大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)elisa檢測試劑盒
一氧化氮合成酶（NOS）檢測試劑盒50T	羧基端小結(jié)構(gòu)域磷酸酶1抗體 CTDSP1
大鼠髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)elisa檢測試劑盒	調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 TLK1
12（FACTOR XIIa）活性比色法定量檢測試劑盒	PYROXD1蛋白抗體 PYROXD1
脊髓小腦共濟失調(diào)10抗體 ATXN10	RAS相關GTP結(jié)合蛋白C抗體 RRAGC
血小板白細胞C激酶底物源結(jié)構(gòu)域M2抗體 PLEKHM2	21號染色體開放閱讀框63抗體 C21orf63
液泡蛋白分選蛋白36抗體 VPS36	5號染色體開放閱讀框33抗體 C5ORF33
低密度脂蛋白受體抗體 LDLR	肌微管素相關蛋白3抗體 MTMR3
短蛋白聚糖抗體 ACAN	FLJ40504蛋白抗體 FLJ40504
FITC標記人CD282 (TLR2)單克隆抗體 human CD282 (TLR2)/FITC	人成骨肉瘤細胞;SAOS-2-LUC硫酸酯酶2蛋白抗體 Sulfatase 2
內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 EDG3	人第八因子相關抗原(FⅧAg)elisa檢測試劑盒
細胞短鏈脂酰脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒	大鼠鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)elisa檢測試劑盒