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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:大鼠KMS-34人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號(hào):P-X9495
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
KMS-34人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:肝癌細(xì)胞帶熒光素酶;HuH-7/LUC (STR) 淀粉樣肽前體蛋白抗體 Cytosolic(SIAL2)ELISA Kit 唾液酸酶定量elisa kit 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8抗體 Lu-139小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
詳情介紹:

KMS-34人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞


英文簡(jiǎn)稱

規(guī)格

貨號(hào)

KMS-34

1×106

P-X9495

產(chǎn)品詳情:


種屬來(lái)源;人

組織來(lái)源;胸腔積液

性別年齡;女性,60

生長(zhǎng)特性;懸浮生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài);細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格;1 X 106cells/T251 mL凍存管

培養(yǎng)條件;RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

凍存條件;90% FBS + 10% DMSO

傳代方法;1:3傳代, 2-3天傳1

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:

1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例:
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實(shí)驗(yàn)原理:


實(shí)驗(yàn)步驟:


1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開(kāi)始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。

公司正在出售的產(chǎn)品:

N-乙酰神經(jīng)氨酸磷酸酶

vaspin檢測(cè)試劑盒

NANP

HumanPPAR-α檢測(cè)試劑盒

4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體

人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa分析檢測(cè)試劑盒

C4orf32

α1-MG ELISA Kit

豬趨化因子配體28(CCL28)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠α1微球蛋白(α1-MG)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠絨毛膜促性腺(CG)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

鴨γ干擾素(IFN-γ)elisa分析檢測(cè)試劑盒

體液HPV7HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR

IFN-γ ELISA Kit

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)elisa檢測(cè)試劑盒

人白三烯C4(LTC4)elisa分析檢測(cè)試劑盒

魚(yú)胰島素受體α亞基(ISR-α)elisa分析檢測(cè)試劑盒

LT-C4檢測(cè)試劑盒

E3連接酶MMS21蛋白抗體

組織GRK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

NSE2/MMS21

人鈣蛋白酶2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)elisa分析檢測(cè)試劑盒

甲型流感病毒血凝素2抗體

大鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶Mu1(GSTM1)elisa分析檢測(cè)試劑盒

H1N1 Hemagglutinin 2

前列腺干細(xì)胞抗原抗體  Anti-PSCA

環(huán)指蛋白92抗體  Anti-TRIM11/RNF92

KMS-34人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型4抗體  Anti-PTPN4/MEG1

絲氨酸蛋白酶抑制劑B11抗體  Anti-SERPINB11

Mouse Anti-Rabbit IgM / Cy3

Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體


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