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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞)

  • 產(chǎn)品型號(hào):P-X10432
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品:SNU-C1人結(jié)腸癌細(xì)胞 SNU-251人卵巢癌細(xì)胞 細(xì)胞化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP完全間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗) RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab5B抗體 RAB5B
詳情介紹:

細(xì)胞接收后的處理:


1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。

H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞)


英文簡稱

規(guī)格

貨號(hào)

H9c

1×106

P-X10432

產(chǎn)品詳情:


細(xì)胞別稱;H9c2 (2-1); H9c2; H9C2;大鼠心肌細(xì)胞系

種屬來源;大鼠

年齡性別;胚胎

組織來源;心臟,心肌層

生長特性;貼壁生長

細(xì)胞形態(tài);成肌細(xì)胞

細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)

背景介紹;H9c2(2-1)細(xì)胞是一株由Kimes·BBrandt·BBD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆得到的細(xì)胞株;H9c2(2-1)細(xì)胞表現(xiàn)出許多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)細(xì)胞中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管,并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%,H9c2(2-1)細(xì)胞融合發(fā)生得很快。

生物等級(jí);1

細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測;無

保藏機(jī)構(gòu);ATCC; CRL-1446 BCRC; 60096 BCRJ; 0098 ECACC; 88092904

培養(yǎng)基;90%DMEM+10%FBS+P/S

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。


一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:

1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例:
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實(shí)驗(yàn)原理:


公司正在出售的產(chǎn)品:

環(huán)指蛋白94抗體  Anti-Trim22/Staf-50/RNF94

細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體  Anti-SMAD5

受體輔助蛋白1抗體  Anti-REEP1

磷酸變位酶1抗體

黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白多糖4抗體  Anti-NG2/CSPG4

EIF2D蛋白抗體

空泡分選蛋白18抗體  Anti-VPS18

Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / Cy5.5

PGAM1

Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體

PSD95相關(guān)緊密連接蛋白PATJ抗體  Anti-PATJ

CCDC18

蛋白C抑制因子抗體  Anti-Protein C inhibitor/SerpinA5

非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體  Anti-Tyk2

EIF2D

大鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)elisa生化檢測試劑盒

鋅指蛋白426抗體  Anti-ZNF426

3-OMD ELISA kit

1型神經(jīng)纖維瘤抗體  Anti-NF1/Neurofibromin 1

人鈣結(jié)合蛋白(CR)elisa生化檢測試劑盒

磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體  Anti-Phospho-RelB(Ser573)

CRELISAKit

剪接體相關(guān)蛋白155抗體  Anti-SAP155/SF3B1

8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)elisa檢測試劑盒

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體β(PPAR-β)elisa檢測試劑盒

全組織琥珀酸脫氫酶活性染色試劑盒

H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞)大鼠白介素6(IL6)elisa檢測試劑盒

三聚氰胺抗體

1號(hào)染色體開放閱讀框124抗體

Melamine

C1orf124

實(shí)驗(yàn)步驟:


1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。
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