需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測(cè)器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過(guò)濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系1個(gè)，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、超純水。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：操作時(shí)間短，48-50T，可測(cè)40例樣本左右，96-100T,可測(cè)80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè)，部分試劑盒取樣多少請(qǐng)；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測(cè)植物。

測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

1%NaCl甘露糖  20支　人鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶2(CaM-kinase kinase 2)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

氨基酸脫羧酶對(duì)照  20支　ELISA Kit for Human Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2 0.156-10 ng/mL

1%NaCl蔗糖  20支　人CD5分子樣蛋白(CD5 antigen-like)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL

鳥氨酸脫羧酶肉湯  20支　ELISA Kit for Human CD5 antigen-like 0.312-20 ng/mL

硝酸鹽肉湯（還原）  20支　人巨噬唾液酸蛋白(Macrosialin)ELISA試劑盒 0.312-20 ug/mL

實(shí)驗(yàn)生化管 KCN Biochemical control 20支　ELISA Kit for Human Macrosialin 0.312-20 ug/mL

D-核糖-雙岐桿鑒定  20支　人胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA試劑盒 1.56-100 mIU/L

D-阿拉伯糖-雙岐桿鑒定  20支　ELISA Kit for Human Caspase-14 1.56-100 mIU/L

乳糖-雙岐桿鑒定  20支　人半胱天冬酶7(CASP-7)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

松三糖-雙岐桿鑒定  20支　ELISA Kit for Human Caspase-7 0.156-10 ng/mL

棉子糖-雙岐桿鑒定  20支　人鈣蛋白酶6(Calpain-6)ELISA試劑盒 15.6-1000 pg/mL

山梨醇-雙岐桿鑒定  20支　ELISA Kit for Human Calpain-6 15.6-1000 pg/mL

淀粉-雙岐桿鑒定  20支　人鈣蛋白酶2催化亞基(Calpain-2 catalytic subunit)ELISA試劑盒 78-5000 pg/mL

內(nèi)源性硫化氫H2S測(cè)試盒PRMT1  蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

RAP2B  原癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AP2B抗體規(guī)格: 0.2ml

PRCP  脯氨酰羧肽酶抗體規(guī)格: 0.1ml

PRDX1  過(guò)氧化還原酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

PRDX3/peroxiredoxin 3  過(guò)氧化還原酶3抗體規(guī)格: 0.1ml

RRM1  核糖核苷酸還原酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

PRDX5/PRDX6  過(guò)氧化還原酶5/6抗體規(guī)格: 0.1ml

PPM2C  蛋白磷酸酶2C抗體規(guī)格: 0.2ml

PRL  泌乳素抗體規(guī)格: 0.2ml

PRL1/PTP4A1  肝再生磷酸酯酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

PRL2/PTP4A2  肝再生磷酸酯酶2抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-PRL(Ser163)  磷酸化泌乳素抗體規(guī)格: 0.1ml

PRL3/PRL-R  磷酸酯酶3蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。