需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個，0.22μm）、濾膜（水系1個，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個，2mL）、超純水。

優(yōu)點如下：

1、快速簡便：操作時間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗： X =99%；

6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強；

7、測試面廣：可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點如下：

1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗： X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。

8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

人乙?；福―AC）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒   正常細胞

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  0.5M Tris-Cl(pH6.8)500ml國產(chǎn)

豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  1.5M Tris-Cl(pH8.8)500ml國產(chǎn)

大鼠生長**釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  10%SDS溶液100ml國產(chǎn)

人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  16HBE(支氣管上皮樣細胞)5×106cells/瓶×2

人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  22RV1(前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

人維生素B6(VB6)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  293(胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  293A (胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  293A，胚腎上皮細胞系（腺病毒包裝級別）

貓細小病毒抗體(FPV)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  293ET(胚腎細胞（SV40T和EBNA1基因修飾細胞）)5×106cells/瓶×2

大鼠黃體**素（LH）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  293E(胚腎細胞（EBNA1基因修飾）)5×106cells/瓶×2

蘋果酸脫氫酶EC1.1.1.37載玻片  P21蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

 冰凍切片組織P21蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

 石蠟切片組織P21蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

   P21蛋白表達比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/50 次

   P21蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/50 次

人肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  骨骼肌完全培養(yǎng)基100mL

人尿游離皮質(zhì)醇(UFC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  骨髓間充質(zhì)干（hMSCs）

人周期素依賴性激酶5(CDK-5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  關(guān)節(jié)軟骨完全培養(yǎng)基100mL

小鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  動脈內(nèi)皮完全培養(yǎng)基100mL

豬磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  海馬神經(jīng)元

大鼠上皮中性?；罨?8(ENA-78/CXCL5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  黑色素瘤英文名稱：MV3

人11β羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  黑色素瘤英文名稱：M14

人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  喉表皮癌英文名稱：Hep-2

人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  呼吸道上皮完全培養(yǎng)基100mL

小鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  滑膜完全培養(yǎng)基100mL

兔白介素1（IL-1）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  呼吸道上皮完全培養(yǎng)基100mL

注意事項：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。