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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個(gè),0.22μm)、濾膜(水系1個(gè),0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個(gè),2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
GFP-Tag Antibody |
50μl |
BH-01S3876 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:操作時(shí)間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗(yàn): X =99%;
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測試面廣:可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人苯丙氨酸(LPA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)
人可溶性粘附分子(Sam)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PC-3(前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人乙型腦炎病毒抗體(JE-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 PC-3M(前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠紅細(xì)胞**素(EPO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PC-3M-2B4(前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2
豬生長抑素(SS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PC-3M-IE8(前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2
大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PIEC(豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2
人可提取核抗原(ENA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PK-15(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Plant Protein Extraction Kit/植物蛋白提取試劑盒25次、100次國產(chǎn)
小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PLC/PRF/5(肝癌亞力山大細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Poly-D-lysine溶液規(guī)格:2mg
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PMSF1g國產(chǎn)
GFP-Tag AntibodyCASPASE-8蛋白**共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
CASPASE-8蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:25次
CASPASE-9蛋白表達(dá)流式 儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
載玻片 CASPASE-9蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
冰凍切片組織CASPASE-9蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
豬白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CFPAC-1(胰腺癌) 5×106cells/瓶×2
大鼠尿激酶(UK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CHL(倉鼠肺) 5×106cells/瓶×2
犬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CHO(倉鼠卵巢) 5×106cells/瓶×2
人副甲狀旁腺**相關(guān)肽(PTHrp)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CHO-K1(倉鼠卵巢亞株) 5×106cells/瓶×2
人凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CNE(鼻咽癌) 5×106cells/瓶×2
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CoC1(卵巢癌) 5×106cells/瓶×2
小鼠堿性成纖維生長因子4(bFGF-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CoC1/DDP(卵巢耐藥亞株) 5×106cells/瓶×2
豬腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COLO 205(結(jié)腸癌) 5×106cells/瓶×2
大鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COLO 320(結(jié)腸癌) 5×106cells/瓶×2
人骨骼肌受體酪氨酸激酶(MUSK)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎) 5×106cells/瓶×2
人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎) 5×106cells/瓶×2