需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系1個(gè)，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、超純水。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡便：操作時(shí)間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測試面廣：可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上，以便 不時(shí)觀察，待對照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測試面廣：可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

大鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SKOV3/Taxol-25, 卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株

大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SMC-1(胸膜瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SMMC-7221/肝癌細(xì)胞株國產(chǎn)

人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SMMC-7221全細(xì)胞裂解液100ug100ug

人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SMMC-7721(肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SNU-5(胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)

大鼠表皮生長因子受體2（Her2）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  SP Mouse HRP Kit/鼠Streptavidin-HRP試劑盒3ml、18ml國產(chǎn)

大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SP Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)/兔&鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)

人抗核周因子抗體(APF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SP Rabbit HRP Kit(DAB)/兔Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)

人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  SP Rabbit & Mouse HRP Kit、兔/鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒3ml、18ml國產(chǎn)

FITC - Goat Anti-Mouse IgGTNF BETA蛋白表達(dá)流式  儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

載玻片  TNF BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

冰凍切片組織TNF BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

石蠟切片組織TNF BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

 載玻片  TNF BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  NCI-N87(胃癌) 5×106cells/瓶×2

小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  NG108-15(小鼠神經(jīng)瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合) 5×106cells/瓶×2

大鼠睪酮(T)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  NIH/3T3(小鼠胚胎) 5×106cells/瓶×2

雞FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  NR8383(大鼠肺泡巨噬) 5×106cells/瓶×2

人表**球蛋白M(mIgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  NRK(大鼠腎) 5×106cells/瓶×2

人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮) 5×106cells/瓶×2

人血管生長素(ANG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  OK(負(fù)鼠腎小管) 5×106cells/瓶×2

小鼠白介素16(IL-16)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  OP9(小鼠骨髓基質(zhì)) 5×106cells/瓶×2

小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  OS-RC-2(腎癌) 5×106cells/瓶×2

雞溶菌酶(LZM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  P19(小鼠畸胎瘤) 5×106cells/瓶×2

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒膠原酶(MMP-8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  OVCAR-3(卵巢癌) 5×106cells/瓶×2

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。