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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
PKD/PKCμ Phospho-Ser738 Antibody |
詳見說明 |
BH-01S3958 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗(yàn): X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
兔子促黃體**(LH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠toll樣受體相關(guān)分子(TRAM)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝癌細(xì)胞英文名稱:H22
大鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝癌細(xì)胞英文名稱:Hepa 1-6
人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝癌細(xì)胞英文名稱:H22
人巨噬細(xì)胞激蛋白(MSP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝癌細(xì)胞英文名稱:Hepa 1-6
人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠白細(xì)胞介素25(IL-25)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
PKD/PKCμ Phospho-Ser738 Antibody線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)流式 儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
載玻片 線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
冰凍切片組織線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
石蠟切片組織線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
載玻片 線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
大鼠甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 HL-02 [L-02,HL-7702], 正常肝上皮
雞可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HUVEC-12, 臍靜脈血管內(nèi)皮系
人膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HUM, 正常主動脈平滑肌
人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HAVSMC, 主動脈平滑肌
小鼠血管**素1(ANG-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 LX-2, 肝星形株
大鼠肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP) ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 3T3-L1, 小鼠前脂肪
雞1,25羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 腫瘤
人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 乳腺癌
人抗胰蛋白酶(AT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MDA-MB-231(ATCC來源), 乳腺癌
小鼠白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Saos-2,成骨肉瘤
人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Raji,Burkitt's淋瘤