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常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細胞或組織樣品的制備:培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
產(chǎn)品名稱 |
PI3K P85 α/γ/β Ab-467/199/464 Antibody |
規(guī)格 |
詳見說明 |
貨號 |
BH-01S4547 |
實驗通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
試劑使用須知:
(1)請參照相關法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行**操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術人員。必須在專業(yè)人士的指導監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關法律法規(guī)正當處理。
(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的**對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
4-碘硝基苯 1-Iodo-4-nitrobenzene,98% 636-98-6 5G
苯己烷標準品 Hexylbenzene,≥99.8% 1077-16-3 1ML
4-溴-3-硝基甲苯 4-Bromo-3-nitrotoluene,90% 5326-34-1 5G
1-溴-4-氯-2-硝基苯 1-Bromo-4-chloro-2-nitrobenzene,97% 41513-04-6 5G
氧化苯乙烯 Styrene oxide,97% 35311 25G
間三聯(lián)苯 m-Terphenyl,99% 33763 25G
鄰三聯(lián)苯 o-Terphenyl,99% 84-15-1 25G
過氧化氫異丙苯 Cumene hydroperoxide,80% 80-15-9 100ML
并五苯 Pentacene,99% 135-48-8 100MG
4-甲基-3-硝基氰苯 4-Methyl-3-nitrobenzonitrile,97% 939-79-7 5G
1,3-雙(三氟甲基)-5... 1,3-Bis(trifluoromethyl)-5-bromobenzen... 328-70-1 10G
[雙(三氟乙酰氧基)... [Bis(trifluoroacetoxy)iodo]benzene,97% 2712-78-9 5G
六甲基苯 Hexamethylbenzene,99% 87-85-4 1G
PI3K P85 α/γ/β Ab-467/199/464 Antibody2 ug TK Renilla TK Renilla 低溫運輸,-20℃保存
5次 PCR法DNA探針辛標記試劑盒 PCR DNA Labeling Kit Series -20℃保存
0.1%蛋白胨水 500ml*20瓶
含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 7.5% NaCl Broth 10個/包
錳鹽營養(yǎng)瓊脂 Mn2+Nutrient Agar 250g
50次 一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout One-Step Colony Plasmid DNAOUT 常溫
1mg 天然蛋白A Native Protein A -20℃保存
2 ug pcDNA6-Myc/His A pcDNA6-Myc/His A 低溫運輸,-20℃保存
血液磷酸二酯酶3(PDE3)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
磷酸二酯酶3(PDE3)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
組織磷酸二酯酶3(PDE3)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
血液磷酸二酯酶3(PDE3)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
磷酸二酯酶4(PDE4)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次