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操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
產(chǎn)品名稱 |
IKK-β Ab-199 Antibody |
規(guī)格 |
詳見說明 |
貨號 |
BH-01S4475 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細胞或組織樣品的制備:培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
實驗通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
試劑使用須知:
(1)請參照相關(guān)法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行**操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當處理。
(4)購買后,請務(wù)必確認標簽上的注意事項;做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的**對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
標準品 反式-2-羥基肉桂酸 2-Hydroxycinnamic acid, predominantly ... 614-60-8 5G
標準品 訶子鞣酸 Chebulagic acid (HPLC,≥98%) 23094-71-5 5MG
標準品 D-(+)-蘋果酸 D(+)-Malic acid,≥97.0% 636-61-3 1G
辛伐他汀 Simvastatin (HPLC,≥97%) 79902-63-9 20MG
尼莫地平 Nimodipine (HPLC,≥98%) 66085-59-4 20MG
尼索地平 Nisoldipine (HPLC,≥98%) 63675-72-9 20MG
標準品 3'-羥基紫檀茋 3'-Hydroxypterostilbene(HPLC,≥98%) 475231-21-1 20MG
標準品 白藜蘆醇-4'-甲醚 4'-Methoxyresveratrol(HPLC,≥98%) 33626-08-3 20MG
松茋 Pinostilbene hydrate (HPLC,≥98%) 42438-89-1 20MG
買麻藤醇 Gnetol,≥98% 86361-55-9 20MG
標準品 3,3',4',5-四甲氧基... 3,3',4,5'-Tetramethoxy-trans-stilbene,... 83088-26-0 20MG
菊粉酶 inulinase (50萬U/克) 9025-67-6 1G
半胱胺鹽酸鹽 Cysteamine hydrochloride,≥98% 156-57-0 25G
IKK-β Ab-199 Antibody1瓶 JeKo-1 株 JeKo-1 低溫運輸和保存
2 ug pGBKT7-Lam pGBKT7-Lam 低溫運輸,-20℃保存
TSA胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基) 用于普通的或營養(yǎng)要求較高的**的培養(yǎng),還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測及**劑**效果的... 250g
100mL Tricine Buffer,0.5M,pH8.0 Tricine Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存
過氧化氫**芽孢條 用于監(jiān)視蒸汽的自含式生物指示劑 100支/盒
即用型平板培養(yǎng)基
UVM1添加劑 UVM Supplement1 1ml*5支
4次 大提柱式酵母DNAout
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