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常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細胞或組織樣品的制備:培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
產(chǎn)品名稱 |
LC3A Antibody |
規(guī)格 |
詳見說明 |
貨號 |
BH-01S4499 |
實驗通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
試劑使用須知:
(1)請參照相關(guān)法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行**操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
(4)購買后,請務(wù)必確認標(biāo)簽上的注意事項;做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標(biāo)簽上的注意事項,做好必要的**對策;對沒有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
2-溴-4-叔丁基苯酚 2-Bromo-4-tert-butylphenol,97.0% 2198-66-5 5G
苯酚- 氯仿- 異戊醇... Phenol – chloroform – isoamyl alcoho... 136112-00-0 100ML
5-溴-2-氯苯酚 5-Bromo-2-chlorophenol,98% 183802-98-4 1G
2,3-二氟-6-硝基苯酚 2,3-Difluoro-6-nitrophenol,98% 82419-26-9 1G
4-氟-3-甲基苯酚 4-Fluoro-3-methylphenol,98% 452-70-0 1G
4-氟-2-甲基苯酚 4-Fluoro-2-methylphenol,99% 452-72-2 5G
4-氟-2-(三氟甲基)... 4-Fluoro-2-(trifluoromethyl)phenol,95% 130047-19-7 1G
3-氯-4-氟苯酚 3-Chloro-4-fluorophenol,98% 2613-23-2 5G
3,4-二氟苯酚 3,4-Difluorophenol,99% 2713-33-9 5G
2-溴-5-氟苯酚 2-Bromo-5-fluorophenol,97% 147460-41-1 5G
2,4-二氟苯酚 2,4-Difluorophenol,99% 367-27-1 5G
4-溴-2,6-二氟苯酚 4-Bromo-2,6-difluorophenol,97% 104197-13-9 1G
4-氟-3-三氟甲基苯酚 4-Fluoro-3-(trifluoromethyl)phenol,98% 61721-07-1 1G
LC3A Antibody5ug 6 nt隨機引物 Hexamer -20℃保存
100μL Etoposide(依托泊苷/鬼臼乙叉苷) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
2 ug pLNCX2 pLNCX2 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 SF767 株 SF767 低溫運輸和保存
2 ug pLKO-puro-TurboGFP pLKO-puro-TurboGFP 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-Tet 3G pCMV-Tet 3G 低溫運輸,-20℃保存
50T 脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
甲基紅試劑 用于甲基紅試驗。 10mL
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