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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
Emerin蛋白抗體 |
英文名稱 |
Anti-Emerin |
貨號 |
BH-K013359 |
英文名稱 Emerin蛋白抗體
中文名稱 Emerin蛋白抗體
別 名 EDMD; EMD; EMD_HUMAN; Emerin; Emery Dreifuss muscular dystrophy; STA.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 28kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Emerin (1-100aa)
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
VGLUT1/BNP1 腦特異性鈉依賴無機(jī)磷轉(zhuǎn)運蛋白抗體 0.2ml
Chloroplast protease 葉綠體蛋白酶抗體(植物) 1ml
Cathepsin C 組織蛋白酶C抗體 0.1ml
CD56/NCAM1 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體 0.1ml
CK3 細(xì)胞角蛋白3抗體 0.1ml
Calbindin/Calbindin D28k 鈣結(jié)合蛋白D28K抗體 0.2ml
Cyclin D2 周期素D2抗體 0.1ml
UGT2B4 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶2B4抗體 0.2ml
Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受體3抗體 0.1ml
CD158e NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體 0.2ml
CEBP-alpha 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體 0.1ml
DDX4/MVH DDX4抗體 0.1ml
ECE1 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體 0.1ml
Emerin蛋白抗體烏索英文名稱:Ursolic acidCAS號:77-52-1分子式:456.7分子量:C30H48O3
1-(二甲乙甲硅烷)咪唑分子式:154.29分子量: C7H14N2Si英文名稱:1- (two methyl ethyl methyl group)CAS號:62365-34-8
醋磺胺甲噁唑分子式:295.31分子量: C12H13N3O4S英文名稱:AcetylsulfamethoxazoleCAS號:21312-10-7
3-甲-1-吡唑分子式:97.12分子量: C4H7N3英文名稱:3- methyl -1-CAS號:1904-31-0
磷酸鋁分子式:121.95分子量: AIPO4英文名稱:Aluminium phosphateCAS號:7784-30-7
間二乙分子式:134.22分子量: C10H14英文名稱:Two ethyl benzeneCAS號:141-93-5
3,6-二乙炔咔唑分子式:215.26分子量: C16H9N英文名稱:3,6- two acetylene carbazoleCAS號:909342-65-0
氯代氫三(三膦)釕(II)甲加合物分子式:分子量:英文名稱:Three (three phenyl phosphate) ruthenium (II) toluene adductCAS號:217661-36-4
葛根素英文名稱:Ge GensuCAS號:3681-99-0分子式:416.3781分子量:C21H20O9
根皮苷英文名稱:Root barkCAS號:7061-54-3分子式:472.44分子量: