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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體

  • 產(chǎn)品型號:BH-K013362
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
詳情介紹:

別    名   Eph receptor B1 + Eph receptor B2 (phospho Y594): p-Eph receptor B1 + Eph receptor B2 (phospho Y594) Eph receptor B1+Eph receptor B2; EPH B1; EPH B2; Eph tyrosine kinase 2; Eph tyrosine kinase 3; EPHB1; EPHB2; Ephrin receptor EphB1; Ephrin receptor EphB2; Ephrin type B receptor 1; Ephrin type B receptor 2; EPHT 2; EPHT 3; ERK; Hek 5; Hek 6; Tyrosine protein kinase receptor EPH2; Tyrosine protein kinase receptor EPH3.
英文名稱  Anti-phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594)

中文名稱  磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體

濃    度  1mg/1ml

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

產(chǎn)品類型  一抗  磷酸化抗體

研究領(lǐng)域  心血管 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 激酶和磷酸酶 細胞膜受體 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 110kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human EphB1+EphB2 around the phosphorylation site of Tyr594

亞    型  IgG 

本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗

抗體的熒光標記法:

(一)基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

(二)儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體;

2.碳酸氫鈉緩沖液;

3.疊氮鈉;

4.庵氰酸熒光素;

5.電磁攪拌器。

抗體反應(yīng)特點:

1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;

2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;

3.適當濃度和比例;

4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。

抗體反應(yīng)的因素:

1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。

實驗步驟:

1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。

3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。

5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。

6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。

14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

 

抗體分子標記技術(shù):

(一)原理

當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

(二)準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;

2.儀器

凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。

(三)操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

phospho-YES1(Tyr426)  磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗體 0.1ml

RNF70  環(huán)指蛋白70抗體 0.2ml

HEY2  轉(zhuǎn)錄因子HEY2蛋白抗體 0.2ml

C19orf24  19號染色體開放閱讀框24抗體 0.2ml

CPNE9  伴侶蛋白9抗體 0.2ml

DRAM  DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體 0.2ml

ASTN2  星形肌動蛋白抗體 0.2ml

ATAD2  三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體 0.2ml

ACPL2  酸性磷酸酶樣蛋白2抗體 0.2ml

Activated protein C/PROC1  活化蛋白C抗體 0.1ml

C1orf67/DNAH14  1號染色體開放閱讀框67抗體 0.2ml

RASSF5  RASSF5抗體 0.2ml

VAPA  囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體 0.2ml

磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體1-丁-3-甲咪唑鎓三溴物分子式:378.93分子量: C8H15Br3N2英文名稱:1- butyl -3- methyl imidazolium bromide threeCAS號:820965-08-0

2-羥-5-吡分子式:110.11分子量: C5H6N2O英文名稱:2- hydroxy -5-CAS號:33630-94-3

亞硝鐵鉀分子式:330.17分子量: K2Fe(CN)5(NO)英文名稱:Potassium nitroferrocyanideCAS號:xcv

2,3-雙(三氟甲)吡分子式:215.1分子量: C7H3F6N英文名稱:2,3- bis (three f) pyridineCAS號:1644-68-4

6--2-硫脲嘧分子式:204.25分子量: C10H8N2OS英文名稱:6- phenyl -2-CAS號:36822-11-4

2-羥-5-硝吡分子式:140.1分子量: C5H4N2O3英文名稱:2- hydroxy -5- nitro pyridineCAS號:5418-51-9

羥吡硫酮分子式:167.15分子量: C5H4NNaOS.H2O英文名稱:羥吡硫酮CAS號:304675-78-3

乙二胺四乙酸二鈉鈷鹽水合物分子式:393.12分子量: C10H12CoN2Na2O8·xH2O英文名稱:Ethylenediaminetetraacetic acid two sodium cobalt salt hydrateCAS號:15137-09-4

2-氯-3,5-二硝吡分子式:203.54分子量: C5H2ClN3O4英文名稱:2- -3,5- twoCAS號:2578-45-2

3-巰-1,2,4-三唑分子式:101.12分子量: C2H3N3S英文名稱:3- -1,2,4- threeCAS號:3179-31-5

抗體的種類:

抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。

(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。

(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)大的球蛋白。抗原初次刺激機體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強,是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)。

(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。

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