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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
內(nèi)皮素2抗體 |
英文名稱 |
Anti-ET-2/Endothelin 2 |
貨號 |
BH-K013429 |
英文名稱 內(nèi)皮素2抗體
中文名稱 內(nèi)皮素2抗體
別 名 EDN2; EDN2_HUMAN; Endothelin 2; Endothelin-2; ET 2; ET-2; ET2; PPET2; Preproendothelin 2; Preproendothelin-2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Cat, Cat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 **學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 2.3kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Endothelin 2
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
phospho-CYLD(Ser418) 磷酸化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 0.1ml
Phospho-EEF2k (Ser366) 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 0.1ml
phospho-FAK(Ser722) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
Factor VIII 第八因子抗體 0.1ml
Hepatitis C Virus NS5a 丙型肝炎病毒NS5A抗體 0.1ml
CPA2/Carboxypeptidase A2 羧肽酶A2抗體 0.1ml
DPOLA/DNA polymerase alpha DNA聚合酶α抗體 0.2ml
polyprotein (DHAV) 鴨甲型肝炎病毒聚蛋白抗體 1ml
ERα/ESR1 雌受體α抗體 0.1ml
GDF8 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 0.2ml
MMP9 基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體 0.1ml
Hepsin 跨膜蛋白酶絲氨酸1抗體 0.2ml
phospho-CDK5(Tyr15) 磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 0.1ml
內(nèi)皮素2抗體密草通英文名稱:Dense grassCAS號:26259-45-0分子式:225.29分子量: C10H19N5O
6-甲氧-1,2,3,4-四氫喹啉分子式:163.22分子量: C10H13NO英文名稱:6- a -1,2,3,4- four hydrogenCAS號:120-15-0
桑根白皮素英文名稱:Mulberry root bark pigmentCAS號:30-2006分子式:分子量:
4-溴-3-甲-5-(三氟甲)-1H-吡唑分子式:分子量: C5H4BrF3N2英文名稱:4- -3- (three -5-) -1H-CAS號:60061-68-9
間溴甲分子式:171.04分子量: C7H7Br英文名稱:Between tolueneCAS號:591-17-3
DBD-COCl分子式:332.76分子量: C11H13ClN4O4S英文名稱:DBD-COClCAS號:156153-43-4
2,6-二甲啉分子式:115.17分子量: C6H13NO英文名稱:2,6- two methyl morpholineCAS號:141-91-3
4,5,6,7-四氫噻吩并[3.2-c]吡分子式:139.22分子量: C7H9NS英文名稱:4,5,6,7- four [3.2-c] pyridineCAS號:54903-50-3
麗春紅S英文名稱:Ponceau SCAS號:6226-79-5分子式:760.61分子量: C22H12N4Na4O13
N-乙酰分子式:150.18分子量: C8H10N2O英文名稱:N- hydracetinCAS號:114-83-0