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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
內(nèi)皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體 |
英文名稱 |
Anti-EDG1/CD363/S1P1 |
貨號 |
BH-K013459 |
英文名稱 內(nèi)皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體
中文名稱 內(nèi)皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體
別 名 CD363; CHEDG1; D1S3362; ECGF1; EDG1; EDG 1; Endothelial differentiation G-protein coupled receptor 1; Endothelial differentiation sphingolipid G protein coupled receptor 1; G protein coupled sphingolipid receptor; S1P receptor 1; S1P receptor Edg-1; S1P1; S1PR1; S1PR1_HUMAN; Sphingosine 1 phosphate receptor Edg 1; Sphingosine 1 phosphate receptor EDG1; Sphingosine 1-phosphate receptor 1; Sphingosine 1-phosphate receptor Edg-1; Sphingosine 1phosphate receptor type 1 S1P1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞凋亡 細胞粘附分子 G蛋白偶聯(lián)受體 內(nèi)皮細胞 細胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EDG1/CD363
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
NSMase2 中性鞘磷脂2抗體 0.2ml
BCHE(1E8) 丁酰膽堿酯酶單克隆抗體 0.2ml
CCL6/C10 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL6抗體 0.2ml
TPO/Thrombopoietin 血小板**素抗體(巨核細胞集落刺激因子) 0.1ml
phospho-MLF1 Interacting Protein/PBIP1(Thr78) 磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 0.1ml
TNFC/lymphotoxin Beta 腫瘤壞死因子C/β抗體 0.2ml
CYP3A1 細胞色素P450 3A1抗體 0.2ml
ATRN 吸引素抗體 0.2ml
C5b-9 末端補體復(fù)合物抗體 0.2ml
CD272/BTLA B和T細胞衰減蛋白抗體 0.2ml
Phospho-c-Fos (Thr325) 磷酸化c-fos抗體 0.1ml
DISC1 (CT) DISC1 C端抗體 0.2ml
Phospho-EGFR(Tyr845) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
內(nèi)皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體5-氯-2-甲并噻唑分子式:183.66分子量: C8H6ClNS英文名稱:5- chloro -2- MethylbenzothiazoleCAS號:1006-99-1
克丹英文名稱:CaptanCAS號:133-06-2分子式:330.6分子量: C9H8NSO2Cl3
3-溴-5-甲氧吡分子式:188.02分子量: C6H6BrNO英文名稱:3- bromide -5- aCAS號:50720-12-2
丁聯(lián)分子式:210.31分子量: C16H18英文名稱:Ding JiCAS號:37909-95-8
5-溴異喹啉分子式:216.04分子量: C6H6BrN3O英文名稱:5- bromideCAS號:34784-04-8
羥紅花黃色素A英文名稱:Hydroxy safflower yellow ACAS號:78281-02-4分子式:612.52分子量:C27H32O16
4,4'-二氯二亞砜分子式:271.16分子量: C12H8Cl2OS英文名稱:4,4'- two chloride two phenylCAS號:3085-42-5
戊菊酯英文名稱:The cyanideCAS號:51630-58-1分子式:419.91分子量: C25H22ClNO3
3-溴-9-乙咔唑分子式:274.16分子量: C14H12BrN英文名稱:3- bromo -9- ethylcarbazoleCAS號:57102-97-3
直接桃紅12B英文名稱:Direct red 12BCAS號:5001-72-9分子式:713.64分子量: C32H21N5Na2O8S2