熒光技術(shù)的實驗步驟：

一、準備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

公司專業(yè)供應(yīng)的抗體，抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品，品質(zhì)**，價格實惠，多種規(guī)格供應(yīng)，售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。

英文名稱  磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體

中文名稱  磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體

別    名  eNOS (phospho S113); p-eNOS (phospho S113); eNOS (Phospho-Ser113); cNOS; eNOS; Constitutive NOS; EC NOS; ecNOS; Endothelial nitric oxidase synthase; Endothelial nitric oxide synthase; Endothelial nitric oxide synthase 3; Endothelial NOS; Nitric oxide synthase 3 (endothelial cell); Nitric oxide synthase 3; Nitric oxide synthase 3 endothelial cell; Nitric oxide synthase endothelial; nitric oxide synthase, endothelial; NOS 3; NOS III; NOS type III; NOS3; NOSIII; NOS3_HUMAN.

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Mouse, Rat, Dog, Rabbit

產(chǎn)品類型  一抗  磷酸化抗體

研究領(lǐng)域  **學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 合成與降解 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 133kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from mouse eNOS around the phosphorylation site of Ser113

亞    型  IgG 

抗體制備過程：

1.材料與試劑

  a．提取的動物 Ig

  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑

  c．青霉素和鏈霉素

  d．實驗動物 兔

  e．其它材料及試劑

2、選擇實驗活體。

3、進行動物實驗。

4、試取血樣進行測試，查看效果。

5、如果成功，殺死實驗活體，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

實驗原理 :

（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 

（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 

（3）結(jié)合細胞：不同類別的球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，參與應(yīng)答。 

（4）可通過胎盤及粘膜：球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動

球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染的主要因素。 

（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 

（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。

抗體的生活習性：

(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。

(2)激活補體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。

(3)結(jié)合細胞：不同類別的球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，產(chǎn)生不同的疚，參與疫應(yīng)答。

(4)可通過胎盤及粘膜：球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。

Lin-28B  RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體 0.2ml

AP2 gamma  轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體 0.1ml

Entactin/Nidogen  巢蛋白1抗體 0.2ml

Natriuretic Peptide Receptor A  利鈉肽受體A抗體 0.2ml

CAPG2/NCAPG2  染色體相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml

NUBP2  核苷酸結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml

ANKRD28  錨蛋白重復(fù)域28抗體 0.2ml

RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2)  磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體 0.1ml

CAGE1/CT3/CT95  腫瘤/抗原3抗體 0.2ml

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr331)  磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體 0.1ml

MCG10  RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體 0.2ml

JMJD2A/KDM4A/JHDM3A  組蛋白去甲基化酶JMJ2A抗體 0.2ml

NPFF/FMRFamide  痛覺調(diào)節(jié)肽NPFF抗體 0.2ml

磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體黃豆黃苷英文名稱：Soya beanCAS號：40246-10-4分子式：446.4分子量：C22H22O10

4-[3-(三氟甲)-3H-雙吖丙-3-]芐溴分子式：279.06分子量： C9H6BrF3N2英文名稱：4-[3- (three trifluoromethyl) -3H- diazirine -3-] benzyl bromideCAS號：92367-11-8

硫代啉分子式：103.19分子量： C4H9NS英文名稱：Ma LanCAS號：123-90-0

2-(4-叔丁)-5-(4-聯(lián))-1,3,4-惡二唑分子式：354.45分子量： C24H22N2O英文名稱：2- (4-) -5- (4-) () -1,3,4- twoCAS號：15082-28-7

十六烷分子式：302.54分子量： C22H38英文名稱：Sixteen benzeneCAS號：1459-09-2

柚皮苷英文名稱：NaringinCAS號：10236-47-2分子式：580.53458分子量：C27H32O14

2-(叔丁氧羰甲)-分子式：214.3分子量： C11H22N2O2英文名稱：2- (TERT butoxycarbonylamino methyl) - piperidineCAS號：141774-61-0

2-碘聯(lián)分子式：280.1分子量： C12H9I英文名稱：2- iodineCAS號：2113-51-1

乙二胺硫酸亞鐵四水合物分子式：310.07分子量： C2H8N2·H2SO4·FeSO4·4H2O英文名稱：Ethylenediamine four ferrous sulfate hydrateCAS號：34962-29-3

1-甲氧-4丙分子式：150.22分子量： C10H14O英文名稱：1- a -4CAS號：104-45-0