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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:高爾基體蛋白A亞基4抗體

  • 產(chǎn)品型號(hào):BH-K013592
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
高爾基體蛋白A亞基4抗體在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對(duì)球蛋白G、A、M、E了解較多,對(duì)D的功能了解較少。
詳情介紹:

別    名   256 kDa golgin; 72.1 protein; GCP2; GOGA4_HUMAN; GOLG; GOLGA4; golgi autoantigen, golgin subfamily a, 4; Golgin subfamily A member 4; golgin-240; Golgin-245; MU-RMS-40.18; OTTHUMP00000161363; OTTHUMP00000208897; OTTHUMP00000209805; p230; Protein 72.1; Trans-Golgi p230.
英文名稱  Anti-Golgin subfamily A member 4/Golgin 245

中文名稱  高爾基體蛋白A亞基4抗體

濃    度  1mg/1ml

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來(lái)源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 261kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Golgin subfamily A member 4/Golgin 245

亞    型  IgG 

本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)

抗體的熒光標(biāo)記法:

(一)基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

(二)儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體;

2.碳酸氫鈉緩沖液;

3.疊氮鈉;

4.庵氰酸熒光素;

5.電磁攪拌器。

抗體反應(yīng)特點(diǎn):

1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;

2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;

3.適當(dāng)濃度和比例;

4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。

抗體反應(yīng)的因素:

1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。

實(shí)驗(yàn)步驟:

1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。

3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。

4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。

5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。

6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)

12、自來(lái)水充分沖洗。

13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。

14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

 

抗體分子標(biāo)記技術(shù):

(一)原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

(二)準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;

2.儀器

凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。

(三)操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。

TNMD/tenomodulin  腱調(diào)蛋白抗體(軟骨調(diào)節(jié)素樣1蛋白) 0.2ml

TRIP1/PSMC5  甲狀腺受體相互作用蛋白1抗體 0.2ml

MTMR8  肌管素相關(guān)蛋白8抗體 0.2ml

PPO  腺樣癌特異性相關(guān)抗原PPO抗體 0.2ml

Ube2L6  泛素載體蛋白L6抗體 0.2ml

FBXL15  FBXL15蛋白抗體 0.2ml

ERM/Etv5  轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體 0.2ml

HAX1  造血干細(xì)胞特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml

RINT1  胞膜間內(nèi)質(zhì)網(wǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml

KLHL14  Kelch樣蛋白14抗體 0.2ml

DHRS13  短鏈脫氫還原酶13抗體 0.2ml

DVL2  蓬亂蛋白2抗體 0.2ml

RNF8  環(huán)指蛋白8抗體 0.2ml

高爾基體蛋白A亞基4抗體水飛薊素英文名稱:SilymarinCAS號(hào):22888-70-6分子式:482.43618分子量:C25H22O10

耐性染色液英文名稱:Acid proof dyeing liquidCAS號(hào):分子式:分子量:

2,3-二氟吡分子式:154.14分子量: C8H7FO2英文名稱:2,3- twoCAS號(hào):1481-27-2

1,4-二(4-吡)分子式:232.29分子量: C16H12N2英文名稱:1,4- two (4- Pi Dingji) benzeneCAS號(hào):113682-56-7

2,3,4-三氟甲分子式:146.11分子量: C7H5F3英文名稱:2,3,4- three fCAS號(hào):193533-92-5

3-氯-4-溴甲分子式:分子量:英文名稱:3- -4- bromideCAS號(hào):

達(dá)旦黃英文名稱:Titan YellowCAS號(hào):1829-00-1分子式:695.73分子量: C28H19N5Na2O6S4

溴鎂英文名稱:Phenyl bromideCAS號(hào):100-58-3分子式:181.31分子量: C6H5MgBr

2,6-二溴-4-甲胺英文名稱:2,6- dibromo -4- methyl anilineCAS號(hào):6968-24-7分子式:264.95分子量: C7H7Br2N

新橙皮苷二氫查爾酮英文名稱:The new hesperidin chalcone two hydrogenCAS號(hào):20702-77-6分子式:630.59分子量:C28H38O16

抗體的種類:

抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對(duì)疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對(duì)D的功能了解較少。

(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時(shí)間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬(wàn)~18萬(wàn),可以通過(guò)兔的胎盤,但不能通過(guò)豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。

(2) IgM:由5個(gè)球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量?jī)H次于IgG,分子量90萬(wàn),是體內(nèi)大的球蛋白??乖醮未碳C(jī)體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量?jī)H次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過(guò)激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量?jī)H為IgG的1/10,且持續(xù)時(shí)間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。

(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬(wàn),亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬(wàn),含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬(wàn),由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過(guò)敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無(wú)作用。

 


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