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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
G蛋白偶聯(lián)受體17抗體 |
英文名稱 |
Anti-GPR17 |
貨號 |
BH-K013983 |
英文名稱 G蛋白偶聯(lián)受體17抗體
中文名稱 G蛋白偶聯(lián)受體17抗體
別 名 DKFZp686M18273; G protein coupled receptor 17; G-protein coupled receptor 17; GPR 17; Gpr17; GPCR17; GPR17_HUMAN; P2Y like receptor; P2Y-like receptor; Probable P2Y purinoceptor GPR 17; Probable P2Y purinoceptor GPR17; R12; UDP/CysLT receptor; Uracil nucleotide/cysteinyl leukotriene receptor.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 41kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human GPR17 (1-63aa)
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
季也蒙假絲酵母 Candida guilliermondii異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
蘇云金芽胞桿松蜀亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimusSTO(小鼠胚成纖維細胞)
NCI-H209(人小細胞肺細胞)普通變形桿 Proteus vulgaris
黑曲霉 Aspergillus niger糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
干酪桿 Lactobacillus casei異常漢遜酵母 Hansenula anomala
人結(jié)腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL
C4-2(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium melilotiHBL-100(人整合SV40基因的腺上皮細胞)
大鼠虹膜色素上皮細胞完全培養(yǎng)基人膀胱成纖維細胞完全培養(yǎng)基
漏斗狀側(cè)耳 Pleurotus sajor-caju樹狀假絲酵母 Candida arborea
中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii橢圓釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus
Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:
RM-1(小鼠前列腺細胞)5×106cells/瓶×2
G蛋白偶聯(lián)受體17抗體炔諾孕酮 英文名稱:Norgestrel 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
喬松素 英文名稱:Qiao Songsu 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
雪膽素乙 英文名稱:Cucurbitacin B 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
紫云英苷;黃芪苷、莰非醇-3-O-葡萄糖 英文名稱:Astragalin; Huang Qigan, kaempferol, -3-O- glucose 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
積雪草苷 英文名稱:Asiaticoside 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
l薟苷 英文名稱:L slices glycoside 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
常春藤苷D;常春藤甙D 英文名稱:Ivy hederagenin glycosides D; D 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
大車前苷 英文名稱:The cart glycoside 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
牛磺熊去氧膽酸 英文名稱:Tauroursodeoxycholic acid 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
黃芪皂苷II 英文名稱:Astragalus saponin II 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
1,5-二啡??鼘幩? 英文名稱:1,5- two Coffee caffeoylquinic acid 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
薯蕷皂苷元 英文名稱:Diosgenin 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支