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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
赤霉素抗體 |
英文名稱 |
Anti-Gibberellins |
貨號 |
BH-K014041 |
英文名稱 赤霉素抗體
中文名稱 赤霉素抗體
別 名 GA3; Gibberellic acid.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Gibberellins
產(chǎn)品類型 一抗 **與化合物抗體
研究領(lǐng)域 **學(xué) **及化合物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 0.34637kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated to Gibberellins
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
COLO 320DM(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株
栗色渾圓鏈霉 Streptomyces castaneoglobosus
發(fā)根根瘤 Rhizobium rhizogenes
小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))5×106cells/瓶×2
IM-9(人外周血B細(xì)胞)RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
膠韌革大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
靈芝 Ganoderma lucidium圓弧青霉 Penicillium cyclopium
苜蓿中華根瘤
大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
大鼠神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
農(nóng)桿 Agrobacterium sp.假單胞 Pseudomonas sp.
赤霉素抗體Hs 746T(人胃細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
RH-35(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2gersion
脫脂奶粉/無脂肪奶粉/Nonfat-Dried Milk蛋白組級 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠胃細(xì)胞英文名稱:MFC
大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
HKC(人胚腎上細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基/Dextrose Peptone Medium藥品、生物制品無試驗 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
卵巢英文名稱:CoC1(懸?。?/span>
Lncap clone FGC(人前列腺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)/支原體瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基/Mycoplasma Agar Base培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠冠狀動脈內(nèi)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL