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別 名 Mitogen-activated protein kinase 4; Extracellular signal-regulated kinase 4; ERK-4; MAP kinase isoform p63; p63-MAPK; MNK2; ERK-4; ERK3; Erk3 related; ERK4; Extracellular signal regulated kinase 4; MAP kinase 4; MAPK 4; MAPK4; Mitogen activated protein kinase 4; MK04_HUMAN; p63 MAPK; p63MAPK; PRKM4; A330097D03Rik; Erk3; p63Mapk; Prkm4.
英文名稱 Anti-MAPK4
中文名稱 絲裂原活化蛋白激酶4抗體
濃 度 1mg/1ml
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 **學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 66kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MAPK4 C-terminus
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
外切酶體成分9(EXOSC9)elisa檢測試劑盒英文名稱:EXOSC9 ELISA Kit,英文縮寫:EXOSC9,產(chǎn)品別名:外切酶體成分9(EXOSC9)ELISA檢測試劑盒,外切酶體成分9(EXOSC9)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
突觸囊泡蛋白ⅩⅤ(SYT15)elisa檢測試劑盒英文名稱:SYT15 ELISA Kit,英文縮寫:SYT15,產(chǎn)品別名:突觸囊泡蛋白ⅩⅤ(SYT15)ELISA檢測試劑盒,突觸囊泡蛋白ⅩⅤ(SYT15)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
唾液淀粉酶α1(AMY1)elisa檢測試劑盒英文名稱:AMY1 ELISA Kit,英文縮寫:AMY1,產(chǎn)品別名:唾液淀粉酶α1(AMY1)ELISA檢測試劑盒,唾液淀粉酶α1(AMY1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
同線蛋白1(ST1)elisa檢測試劑盒英ACR1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
絲甘蛋白聚糖(SRGN)elisa檢測試劑盒英文名稱:SRGN ELISA Kit,英文縮寫:SRGN,產(chǎn)品別名:絲甘蛋白聚糖(SRGN)ELISA檢測試劑盒,絲甘蛋白聚糖(SRGN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
水通道蛋白8(AQP8)elisa檢測試劑盒英文名稱:AQP8 ELISA Kit,英文縮寫:AQP8,產(chǎn)品別名:水通道蛋白8(AQP8)ELISA檢測試劑盒,水通道蛋白8(AQP8)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
嗜酸粒趨化因子(ECF)elisa檢測試劑盒英文名稱:ECF ELISA Kit,英文縮寫:ECF,產(chǎn)品別名:嗜酸粒趨化因子(ECF)ELISA檢測試劑盒,嗜酸粒趨化因子(ECF)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
失調(diào)蛋白7(ATXN7)elisa檢測試劑盒英文名稱:ATXN7 ELISA Kit,英文縮寫:ATXN7,產(chǎn)品別名:失調(diào)蛋白7(ATXN7)ELISA檢測試劑盒,失調(diào)蛋白7(ATXN7)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
BPL Agar Brilliant-green phenol-red lactose agar acc.to KAUFFMANN 1.07236.0500MERCK默克
DEV Lactose peptone broth DEV乳糖蛋白胨肉湯 1.10690.0500MERCK默克
Agar LEVINE-EMB eosine-methylene blue-lactose agar acc.to LEVINE, 1.01342.0500MERCK默克
Peptone water( buffered) 緩沖蛋白胨水 1.07228.0500MERCK默克
THAYER-MARTIN supplement1( VCT inhibitor combination) 1.10729.0001MERCK默克
假單分離瓊脂 用甘油在色素形成基礎(chǔ)上選擇分離、鑒別銅綠假單胞500g
Skim Milk
絲裂原活化蛋白激酶4抗體3-甲-5-對甲-1H-吡唑分子式:CAS號:90861-52-2分子量: C11H12N2
駢三氮唑分子式:119.13CAS號:95-14-7分子量: C6H5N3
(2-甲丙-1--1-)分子式:132.2CAS號:768-49-0分子量: C10H12
6-甲氧-4-甲喹啉水合物分子式:173.22CAS號:41037-26-7分子量: C11H11NO·xH2O
5-硝-6-氯代甲-3-磺鈉鹽英文名稱:5- nitro -6- -3- sulfonic acid sodium salt分子量:CAS號:
3-異惡唑分子式:84.08CAS號:1750-42-1分子量: C3H4N2O
2-氟-6-溴甲分子式:189.02CAS號:分子量: C7H6BrF
2,6-二甲分子式:122.17CAS號:823-40-5分子量: C7H10N2
1-(4-乙氧)乙炔-4-正戊分子式:292.41CAS號:95480-29-8分子量: C21H24O
3-羥-2,4,6-三溴甲(TBHBA)英文名稱:3- hydroxy -2,4,6- three bromo benzoic acid (TBHBA)分子量: C7H3Br3O3CAS號:14348-40-4
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)大的球蛋白??乖醮未碳C(jī)體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。