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抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)大的球蛋白。抗原初次刺激機(jī)體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。
別 名 Class E basic helix-loop-helix protein 32; BHLHE32; bHLHe32; Class E basic helix-loop-helix protein 32; CMM8; Homolog of mouse microphthalmia; Mi; Microphthalmia associated transcription factor; Microphthalmia, mouse, homolog of; Microphthalmia-associated transcription factor; MITF; MITF_HUMAN; WS2; WS2A.
英文名稱 Anti-MITF
中文名稱 MITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體
濃 度 1mg/1ml
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 **學(xué) 染色質(zhì)和核信號 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 59kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MITF C-terminus
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
血紅素加氧酶1(HO-1)elisa檢測試劑盒英文名稱:HO-1 ELISA Kit,英文縮寫:HO-1,產(chǎn)品別名:血紅素加氧酶1(HO-1)ELISA檢測試劑盒,血紅素加氧酶1(HO-1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
新喋呤(NEOP)elisa檢測試劑盒英文名稱:NEOP ELISA Kit,英文縮寫:NEOP,產(chǎn)品別名:新喋呤(NEOP)ELISA檢測試劑盒,新喋呤(NEOP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)elisa檢測試劑盒英文名稱:AT2R-Ab ELISA Kit,英文縮寫:AT2R-Ab,產(chǎn)品別名:血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA檢測試劑盒,血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)elisa檢測試劑盒英文名稱:TAFI ELISA Kit,英文縮寫:TAFI,產(chǎn)品別名:纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA檢測試劑盒,纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
毒性T相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)elisa檢測試劑盒英文名稱:CTLA-4/CD152 ELISA Kit,英文縮寫:CTLA-4/CD152,產(chǎn)品別名:毒性T相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA檢測試劑盒,毒性T相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
維生素D(VD)elisa檢測試劑盒英文名稱:VD ELISA Kit,英文縮寫:VD,產(chǎn)品別名:維生素D(VD)ELISA檢測試劑盒,維生素D(VD)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
同源框A3(HOXA3)elisa檢測試劑盒英文名稱:HOXA3 ELISA Kit,英文縮寫:HOXA3,產(chǎn)品別名:同源框A3(HOXA3)ELISA檢測試劑盒,同源框A3(HOXA3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
碳酸酐酶6(CA-6)elisa檢測試劑盒英文名稱:CA-6 ELISA Kit,英文縮寫:CA-6,產(chǎn)品別名:碳酸酐酶6(CA-6)ELISA檢測試劑盒,碳酸酐酶6(CA-6)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)elisa檢測試劑盒英文名稱:ANP32E ELISA Kit,英文縮寫:ANP32E,產(chǎn)品別名:酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)ELISA檢測試劑盒,酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
嗜酸性粒陽離子蛋白(ECP)elisa檢測試劑盒英文名稱:ECP ELISA Kit,英文縮寫:ECP,產(chǎn)品別名:嗜酸性粒陽離子蛋白(ECP)ELISA檢測試劑盒,嗜酸性粒陽離子蛋白(ECP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
腎胺酶(RNLS/MAO-C)elisa檢測試劑盒英文名稱:RNLS/MAO-C ELISA Kit,英文縮寫:RNLS/MAO-C,產(chǎn)品別名:腎胺酶(RNLS/MAO-C)ELISA檢測試劑盒,腎胺酶(RNLS/MAO-C)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Antibiotic agar No.12 GROVE and RANDALL medium No.12 瓊脂12號 1.10672.0500MERCK默克
Columbia agar base 哥倫比亞瓊脂基礎(chǔ) 1.10455.0500MERCK默克
雙糖鐵瓊脂
Nutrient broth 營養(yǎng)瓊脂 1.05443.0500MERCK默克
Standard nutrient agar標(biāo)準(zhǔn)I營養(yǎng)瓊脂 1.07881.0500MERCK默克
PALCAM Medium Base
緩沖氯化鈉-蛋白胨溶液pH7.0 緩沖液和溶液500mL*10
MITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體鈷試劑英文名稱:Cobalt reagent分子量: C10H7NO2CAS號:131-91-9
8-溴-2-氯喹啉分子式:242.4997CAS號:163485-86-7分子量: C9H5BrClN
二甲酚藍(lán)英文名稱:Xylene phenol blue分子量: C23H22O5SCAS號:125-31-5
引杜林(水溶)英文名稱:Lead Dulin (Shui Rong)分子量:CAS號:8004-99-7
1,3-雙[4-(3-氧)甲酰]分子式:500.54CAS號:110471-15-3分子量: C32H24N2O4
鄰二甲英文名稱:Two formic acid分子量: C8H6O4CAS號:88-99-3
硫酸鈦分子式:240.02CAS號:18130-44-4分子量: Ti(SO4)2
桔皮素英文名稱:HESPERITIN分子量:C20H20O7CAS號:481-53-8
3-(2-氨乙)吡分子式:283.99CAS號:307496-23-7分子量: C7H10N22HBr
3-溴-2-硝吡分子式:202.99CAS號:54231-33-3分子量: C5H3BrN2O2