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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
磷酸化自噬相關蛋白4D抗體 |
英文名稱 |
Anti-phospho-ATG4D(Ser467) |
貨號 |
BH-K016211 |
英文名稱 Anti-phospho-ATG4D(Ser467)
中文名稱 磷酸化自噬相關蛋白4D抗體
別 名 APG4 D; APG4D; ATG4 autophagy related 4 homolog D; Atg4dl; AUT like 4 cysteine endopeptidase; AUTL4; Autophagin 4; Autophagy related cysteine endopeptidase 4; Autophagy related protein 4 homolog D; Cysteine protease ATG4D.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ATG4D around the phosphorylation site of Ser467 [RP(p-S)SE]
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)elisa檢測試劑盒英文名稱:MMP25 ELISA Kit,英文縮寫:MMP25,產(chǎn)品別名:基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)ELISA檢測試劑盒,基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
核黃素激酶(RFK)elisa檢測試劑盒英文名稱:RFK ELISA Kit,英文縮寫:RFK,產(chǎn)品別名:核黃素激酶(RFK)ELISA檢測試劑盒,核黃素激酶(RFK)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
黃體**素(LH)elisa檢測試劑盒英文名稱:LH ELISA Kit,英文縮寫:LH,產(chǎn)品別名:黃體**素(LH)ELISA檢測試劑盒,黃體**素(LH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
骨橋素(OPN)elisa檢測試劑盒英文名稱:OPN ELISA Kit,英文縮寫:OPN,產(chǎn)品別名:骨橋素(OPN)ELISA檢測試劑盒,骨橋素(OPN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
高敏甲狀腺素(u-T4)elisa檢測試劑盒英文名稱:u-T4 ELISA Kit,英文縮寫:u-T4,產(chǎn)品別名:高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測試劑盒,高敏甲狀腺素(u-T4)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
甘露糖(Mannose)elisa檢測試劑盒英文名稱:Mannose ELISA Kit,英文縮寫:Mannose,產(chǎn)品別名:甘露糖(Mannose)ELISA檢測試劑盒,甘露糖(Mannose)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
肺炎衣原體抗原(Cpn)elisa檢測試劑盒英文名稱:Cpn ELISA Kit,英文縮寫:Cpn,產(chǎn)品別名:肺炎衣原體抗原(Cpn)ELISA檢測試劑盒,肺炎衣原體抗原(Cpn)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
多效生長因子(PTN)elisa檢測試劑盒英文名稱:PTN ELISA Kit,英文縮寫:PTN,產(chǎn)品別名:多效生長因子(PTN)ELISA檢測試劑盒,多效生長因子(PTN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
第八因子相關抗原(FⅧAg)elisa檢測試劑盒英文名稱:FⅧAg ELISA Kit,英文縮寫:FⅧAg,產(chǎn)品別名:第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA檢測試劑盒,第八因子相關抗原(FⅧAg)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
蛋白S(ProteinS)elisa檢測試劑盒英文名稱:ProteinS ELISA Kit,英文縮寫:ProteinS,產(chǎn)品別名:蛋白S(ProteinS)ELISA檢測試劑盒,蛋白S(ProteinS)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
催產(chǎn)素受體(OXTR)elisa檢測試劑盒英文名稱:OXTR ELISA Kit,英文縮寫:OXTR,產(chǎn)品別名:催產(chǎn)素受體(OXTR)ELISA檢測試劑盒,催產(chǎn)素受體(OXTR)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
神經(jīng)***轉(zhuǎn)化酶2抗體
GSK3B相互作用蛋白抗體
軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體
磷酸化分化相關基因NDRG1抗體
富含亮氨酸重復結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
神經(jīng)生長因子4/5抗體
醌氧化還原酶抗體
嗅球蛋白3抗體
卵巢癌相關基因2蛋白抗體
蛋白激酶C zeta 抗體
磷酸化蛋白激酶C nu型抗體
磷酸化自噬相關蛋白4D抗體替卡西林(標準品)3Methylthiophene25ML多肽試劑
RGD肽2Methylthiophene ,≥98%25G多肽試劑
肝素2Chlorothiophene,>96.0%25G多肽試劑
促胰液素;胰泌素2,5Dibromothiophene ,≥96.0%10G多肽試劑
麝香草Dibenzothiophene, ≥99.0%1G多肽試劑
普拉洛芬2Hexylthiophene ,≥97%1G多肽試劑
普拉洛芬(標準品)4,6Dimethyldibenzothiophene, ≥99.0%250MG多肽試劑
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五2Acetylthiophene,≥99.0%25G多肽試劑
啶;啶2Acetyl5bromothiophene,≥99.0%5G多肽試劑
糖原,α1,6 葡聚糖,糖元3,4Ethylenedioxythiophene ,≥97.0%5G多肽