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抗體的種類(lèi):
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類(lèi)型.目前對(duì)疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對(duì)D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類(lèi)球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時(shí)間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬(wàn)~18萬(wàn),可以通過(guò)兔的胎盤(pán),但不能通過(guò)豬和牛的胎盤(pán)。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個(gè)球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量?jī)H次于IgG,分子量90萬(wàn),是體內(nèi)大的球蛋白??乖醮未碳C(jī)體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量?jī)H次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過(guò)激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量?jī)H為IgG的1/10,且持續(xù)時(shí)間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬(wàn),亦稱(chēng)為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱(chēng)為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬(wàn),含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬(wàn),由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過(guò)敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無(wú)作用。
別 名 p-DAG1(Tyr892); Alpha Dystroglycan (phospho Y892); AGRNR; Alpha-DG; Beta-DG; Beta-dystroglycan; beta Dystroglycan; DAG; Dag1; DAG1_HUMAN; Dystroglycan 1 (dystrophin-associated glycoprotein 1); Dystroglycan; Dystrophin-associated glycoprotein 1; 156DAG; A3a.
英文名稱(chēng) Anti-phospho-DAG1(Tyr892)
中文名稱(chēng) 磷酸化肌萎縮相關(guān)蛋白DAG1抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 **學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human DAG1 around the phosphorylation site of Tyr892
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴(lài)氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來(lái)水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforRAB5A,MemberRASOncogeneFamily(RAB5A) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
間羥腎上腺素(MN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforMetanephrine(MN) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
乙酰膽堿(ACH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforAcetylcholine(ACH) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
絲氨酸肽酶抑制因子Kazal型1(SPINK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforSerinePeptidaseInhibitorKazalType1(SPINK1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2(NINJ2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforNinjurin2(NINJ2) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
Megane蛋白(Mgn)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforMegane(Mgn) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforGlutathioneSTransferaseAlpha1(GSTa1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforProlactin(PRL) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforGlutathioneSTransferaseTheta1(GSTt1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
高遷移率族ATHook蛋白1(HMGA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforHighMobilityGroupATHookProtein1(HMGA1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
肌球蛋白輕鏈激酶2抗體
MYC結(jié)合蛋白2抗體
基質(zhì)金屬蛋白酶-8/膠原酶2抗體
金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體
甲基化樣蛋白11抗體(N端)
膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體
核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體
軸突生長(zhǎng)誘向因子G1配體抗體
利鈉肽受體B抗體
γ-分泌酶組件蛋白NCLN抗體
核分離基因C蛋白抗體
磷酸化肌萎縮相關(guān)蛋白DAG1抗體井岡Triethyl methanetricarboxylate,98%5G通用試劑
腐草Triethyl orthoacetate,≥98.0%100ML通用試劑
寡1,1,2Trichloroethane,99%500G表面活性劑
紡錘菌素Triethyl orthopropionate,97%25ML通用試劑
頭孢菌素C鋅鹽1,1,2Trichloroethane,96%250ML表面活性劑
細(xì)胞松弛素BTriethylene glycol dimethacrylate,95%50ML通用試劑
煙曲2acetamido5chlorobenzoate,98%10G通用試劑
寡BAcetic Acid 4Ethylphenyl Ester,98%25G通用試劑
棒曲1,3,5Tribromobenzene,98%25G表面活性劑
3二甲 Acetic Acid 4Fluorophenyl acetate,98%5G通用試劑
氟甲(標(biāo)準(zhǔn)品)trans2Hexenyl acetate,98%25G通用試劑
氟甲pDibromobenzene,98%25G表面活性劑
噁/奧啉cis3Hexenyl acetate,≥98%25G通用試劑
柄曲5Hexenyl acetate,98%5G通用試劑
尼日利亞菌素鹽4Bromobiphenyl,98%25G表面活性劑