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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標(biāo)志物) |
英文名稱 |
Anti-BrdU(A7) |
貨號(hào) |
BH-K016747 |
英文名稱 Anti-BrdU(A7)
中文名稱 溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標(biāo)志物)
別 名 Bromodeoxyuridine; Bromodeoxyuridine; 5-Bromo-2′-deoxyuridine; 5-BrdU; Proliferation Marker.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg 1ml/1mg
抗體來(lái)源 Mouse
克隆類型 monoclonal
克 隆 號(hào) A7
交叉反應(yīng) BrdU
產(chǎn)品類型 一抗 **與化合物抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 **學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 神經(jīng)生物學(xué) **及化合物 細(xì)胞類型標(biāo)志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 0.3071kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
免 疫 原 bromodeoxyuridine conjugated to KLH
亞 型 IgG
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
(親和層析純化) 規(guī)格: 1mg Rabbit anti-mouse IgG1, kappa chain
羊抗小鼠IgG抗血清 規(guī)格: 1ml Goat Anti-Mouse IgG Whole serum
兔抗牛血清白蛋白抗血清 規(guī)格: 1ml Anti-BSA
促胃泌素釋放肽(抗原) 規(guī)格: 0.5mg GRP( Gastrin Releasing Peptide )
肌動(dòng)蛋白(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta)
腦鈉素(多肽抗原) 規(guī)格: 0.5mg BNP
G蛋白偶聯(lián)受體-2(抗原) 規(guī)格: 0.5mg CKR-L2( G protein-coupled receptor-2 )
雌受體(多肽抗原) 規(guī)格: 0.5mg ER-Alpha peptide
磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗原 規(guī)格: 0.5mg p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810)
神經(jīng)肽 Y(抗原) 規(guī)格: 0.5mg NPY ( Neuropeptide Y)
風(fēng)疹病毒糖蛋白多肽片段 規(guī)格: 0.5mg glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus]
Multi-tagged Protein Lysate(293T)/多標(biāo)簽蛋白裂解液(293T)100ug100uggersion
SF17(人腦瘤)5×106cells/瓶×2
White MediumBR5升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
42℃生長(zhǎng)培養(yǎng)基/42℃ Growth Medium副溶血弧42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
PANC-1(人胰腺)5×106cells/瓶×2
KATO III(人胃)5×106cells/瓶×2
人腺成纖維完全培養(yǎng)基100mL
人惡性膠質(zhì)母瘤英文名稱:U87MG
Hs 746T(人胃)5×106cells/瓶×2
HBZY-1(大鼠腎小球系膜)5×106cells/瓶×2
溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標(biāo)志物)質(zhì)量規(guī)格:BSMethylsalicylate,≥98%
質(zhì)量規(guī)格:用于生研究,進(jìn)口Ethylpalmitate,≥95%
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTrimethylphosphonoacetate,98%
質(zhì)量規(guī)格:80%,進(jìn)分Tetraethylorthosilicate,98%
質(zhì)量規(guī)格:IND,進(jìn)分Propylacetate,≥98%
質(zhì)量規(guī)格:ARMethylsalicylate,≥98%
質(zhì)量規(guī)格:BSPhenylacetate,99%
質(zhì)量規(guī)格:ARIsoamylbutyrate,≥98%
質(zhì)量規(guī)格:AREthylisovalerate,≥98%
質(zhì)量規(guī)格:BSMethyloleate,99%
質(zhì)量規(guī)格:BSEthyloleate,98%
質(zhì)量規(guī)格:ARButyloleate,75%
質(zhì)量規(guī)格:>90%Methylbenzoate,≥98%
質(zhì)量規(guī)格:0.98Isopropylbenzoate,99%
質(zhì)量規(guī)格:ARButylbenzoate,≥98%