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別 名 A kinase (PRKA) anchor protein 6; A kinase anchor protein 100; A kinase anchor protein 100 kDa; A kinase anchor protein 6; ADAP 100; ADAP 6; ADAP100; ADAP6; AKAP 100; AKAP 6; AKAP100; Human A kinase anchor protein AKAP100; KIAA0311; mAKAP; PRKA 6; PRKA6; Protein kinase A anchoring protein 6; AKAP6_HUMAN.
英文名稱(chēng) Anti-AKAP6
中文名稱(chēng) 蛋白激酶A錨定蛋白6抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 257kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKAP6
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴(lài)氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來(lái)水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
丁酰膽堿脂酶抗原(C端) 規(guī)格: 0.5mg BCHE(butyrylcholinesterase)CT
心肌肌凝蛋白多肽 規(guī)格: 0.5mg SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain)
成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽) 規(guī)格: 0.5mg CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)
醋酸促生長(zhǎng)釋放肽6 規(guī)格: 1g GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6)
角蛋白7抗原 規(guī)格: 0.5mg CK7(Cytokeratin 7)human
人巨病毒UL23抗原 規(guī)格: 0.5mg HCMV UL23/HHV5 UL23(Human Cytomegalovirus UL23 Gene)
生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因153抗原 規(guī)格: 0.5mg GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153)
內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗原 規(guī)格: 0.5mg Endostatin
人類(lèi)血紅蛋白α1抗原 規(guī)格: 0.5mg HBA1(hemoglobin alpha 1)
小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg IFABP(Intestinal Fatty acid binding protein)
白介素-1受體拮抗劑抗原 規(guī)格: 0.5mg IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide
周期與凋亡檢測(cè)試劑盒大球蓋菇 Stropharia rugoso-annulata
Anglne(人卵巢)串珠 Leuconostoc lactis
銀耳 Tremella fuciformis液化沙雷氏 Serratia liquefaciens
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae7.5% NaHCO3溶液
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae微桿屬 Microbacterium sp.
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元人神經(jīng)小膠質(zhì)完全培養(yǎng)基
人腦膠質(zhì)瘤田菁根瘤 Azorhizobium canlinodans
側(cè)耳 Pleurotus sp.冬蟲(chóng)夏草 Cordyceps sinensis
解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica少根根霉 Rhizopus arrhizus
L-GlutamineDami(人巨核白血病)
蛋白激酶A錨定蛋白6抗體質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Iodoacetamide(BioUltra,≥99%)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口1,1'Carbonyldiimidazole(CDI)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Imidazole(ACSreagent,≥99%)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Imidazole(formolecularbiology,≥99%)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Hydroxyurea(≥98%,TLC,powder)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口8Hydroxyquinoline(≥99%,crystalline)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口6Hydroxydopamine(≥97%,6OHDA)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Hemin(BioXtra,fromPorcine,≥98.0%)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口HATMediaSupplement(50×)HybriMax
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Guanidinethiocyanate(≥97.0%)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Guanidinethiocyanate(formolecularb...
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Guanidinehydrochloride(≥99.0%)
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Guanidinehydrochloride(formolecular...
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Gumarabicfromacaciatree
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Glycerol(ACSreagent,≥99.5%)
抗體的種類(lèi):
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類(lèi)型.目前對(duì)疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對(duì)D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類(lèi)球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時(shí)間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬(wàn)~18萬(wàn),可以通過(guò)兔的胎盤(pán),但不能通過(guò)豬和牛的胎盤(pán)。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個(gè)球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量?jī)H次于IgG,分子量90萬(wàn),是體內(nèi)大的球蛋白??乖醮未碳C(jī)體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量?jī)H次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過(guò)激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量?jī)H為IgG的1/10,且持續(xù)時(shí)間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬(wàn),亦稱(chēng)為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱(chēng)為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬(wàn),含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬(wàn),由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過(guò)敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無(wú)作用。