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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產品僅用于科研實驗。
產品名稱 |
褐黑素相關蛋白ART抗體 |
英文名稱 |
Anti-AGRP |
貨號 |
BH-K016917 |
英文名稱 Anti-AGRP
中文名稱 褐黑素相關蛋白ART抗體
別 名 Agouti Related Protein Homolog; agouti signaling protein; agouti switch protein; Agouti-related protein; Agrp; AGRP_HUMAN; AGRT; ART; ASIP2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human,
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導
蛋白分子量 predicted molecular weight: 12kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AGRP (31-80aa)
產品應用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
調亡誘導因子(多肽片斷抗原) 規(guī)格: 0.5mg AIF (Apoptosis-Inducing Factor)
鈣調節(jié)蛋白-1(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Calponin 1
第八因子相關抗原(多肽片斷抗原) 規(guī)格: 0.5mg factor VIII
丙型肝炎病毒-NS3(抗原) 規(guī)格: 0.5mg HCV-NS3
致癌基因(抗原) 規(guī)格: 0.5mg MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC
磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg phospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse)
組織蛋白酶B抗原 規(guī)格: 0.5mg cath-B/CB(Cathepsin B)
分泌素受體(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Secretin receptor
抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3 規(guī)格: 1g Argireline peptide
角蛋白2抗原 規(guī)格: 0.5mg CK2(casein kinase 2)
色素P450 3A4抗原 規(guī)格: 0.5mg CYP3A4(Cytochrome p450 3A4)
Molt-4/急性母白血病阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii愛媛鏈輪絲 Streptomyces ehimense
SW 1353(人骨肉瘤)葡枝根霉 Rhizopus stolonifer
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii黑木耳 Auricularia auricula
大腸桿 Escherichia coliL-Glutamine (100X)
穗霉屬 Spicaria sp.大麗輪枝-北京病圃系 Verticillium Verticillium dahliea Kleb
CRFK(貓腎)植物桿 Lactobacillus plantarum
地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis大鼠骨骼肌完全培養(yǎng)基
毛柄**(金針菇) Flammulina velutipesMLF, 小鼠成纖維
豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
褐黑素相關蛋白ART抗體質量規(guī)格:>98%,BR2Bromostyrene(97%)
質量規(guī)格:>99.5%,EPCytochalasinBfromDrechsleradematio...
質量規(guī)格:>98%,BRNAcetylglycine(99%)
質量規(guī)格:>98%,BRAcetal
質量規(guī)格:>80%,BCAcetaldehydeoxime(99%)
質量規(guī)格:>98%,BCAcetal(99%)
質量規(guī)格:>98%,BRαAsarone(98%)
質量規(guī)格:>98%,BR2,4Dinitrophenylhydrazine(≥99.0%,HP...
質量規(guī)格:>95%,BRAcetylthiocholinechloride(≥99%,TLC)
質量規(guī)格:分子生物學級OxGallPow
質量規(guī)格:>98%,BCPhenylβDglucopyranoside(97%)
質量規(guī)格:>98%,BRPigGallPowder
質量規(guī)格:>98%,BCPhosphomolybdicAcidHydrate
質量規(guī)格:>98%,BR4Chloroaniline(98%)
質量規(guī)格:>98%,BRThiourea(≥99.0%,ACS)